WYE-125132 (WYE-132)

Catalogusnr.S2661 Batch:S266101

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H33N7O4
Molecuulgewicht 519.6 CAS-nr. 1144068-46-1
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 104 mg/mL (200.15 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%PEG400 0.5%Tween80 5%propylene glycol

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 30.000mg/ml (57.74mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving WYE-125132 (WYE-132) is een zeer krachtige, ATP-competitieve mTOR-remmer met een IC50 van 0,19 nM; het is zeer selectief voor mTOR versus PI3K's of PI3K-gerelateerde kinasen hSMG1 en ATR.
Doelen
mTOR
(Cell-free assay)
0.19 nM
In vitro WYE-125132 (WYE-132) remt krachtig en ATP-competitief recombinant mTOR kinase met een IC50 van 0,19 nM en vertoont ook een hoge selectiviteit ten opzichte van verschillende PI3K's en een panel van 230 proteïnekinasen. In vitro vertoont het een aanzienlijke anti-proliferatieve activiteit tegen een panel van tumorzellijnen met IC50's variërend van 2 nM (LNCap) tot 380 nM (HTC116). Bovendien veroorzaakt deze verbinding ook celcyclusprogressie, inductie van apoptose en remming van eiwitsynthese en celgrootte. Het resulteert in een aanzienlijke reductie van de synthese van pre-tRNALeu met respectievelijk 72%, 80% en 53% in actief prolifererende cellen van MG63, MDA361 en HEK293 door mTORC1 te remmen. Bovendien blijkt WYE-125132 ook de defosforylering van Maf1 (negatieve regulator van Pol III transcriptie) en de accumulatie ervan in de celkern te induceren.
In Vivo WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produceert een significante antitumoractiviteit en veroorzaakt een dosisafhankelijke vertraging van de tumorgroei in het PI3K/mTOR- en HER2-hyperactieve MDA361 tumormodel. Bovendien toont het ook een krachtige antitumoractiviteit in de PTEN-null glioom U87MG, niet-kleincellige longkanker H1975 en A549 modellen.
Functies Een zeer krachtige, ATP-competitieve en specifieke mTOR kinase-remmer.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Kinase assays

    mTOR-enzymassays via dissociatie-versterkte lanthanide fluorescentie-immunoassay (DELFIA), ATP-matrixassays en mTOR-immuuncomplex kinase-assays worden als volgt uitgevoerd voor WYE-125132 (WYE-132). Het endogene TOR van LNCap-celysaat wordt geïmmunoprecipiteerd door anti-FRAP/TOR (N-19). Celysaat (1,0 mg) wordt gemengd met 4 μg antilichaam gekoppeld aan proteïne-G/A-agarose in 1 ml lysisbuffer. De immuuncomplexen worden sequentieel gewassen met lysisbuffer, lysisbuffer plus 500 mM KCl en kinasebufferwas. De immuuncomplexen worden gedurende 30 minuten bij 30 °C onderworpen aan een kinasereactie in een eindvolume van 50 μL met 10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerofosfaat en 0,5 μM microcystine LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl2, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K of 1 μg His6-4EBP1. Kinasereacties (immuuncomplex en gezuiverde enzymen) worden beëindigd door NuPAGE LDS-samplebuffer en opgelost in een 4-12% NuPAGE Bis-Tris gel voor Western blotting met anti-P(T389)-p70S6K en anti-P(T46)-4EBP1, anti-FRAP/TOR (N-19), anti-FLAG M2 en anti-His6 (Kloon His-1). In de radioactieve assay worden 10 μCi [γ-32P]ATP (3000 Ci/mmol) en 100 μM koud ATP gebruikt. 32P-gelabelde producten worden opgelost door SDS-PAGE en onderworpen aan autoradiogram op Kodak röntgenfilms.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa

  • Concentraties

    0 to 10 μM

  • Incubatietijd

    24 hours

  • Methode

    Cell lines of MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa are obtained from the American Type Culture Collection. Cell growth assays and IC50 determination are described as follows. For tumor cell growth assays, cells are plated in 96-well culture plates at 1000 to 3000 cells per well for 24 hours, treated with DMSO or various doses of WYE-125132 (WYE-132). Viable cell densities are determined three days later by MTS assay employing an assay kit following the kit assay protocol. The effect of each treatment is calculated as percent of control growth relative to the DMSO-treated cells grown in the same culture plate. Inhibitor dose response curves are plotted for determination of IC50 values.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    U87MG, MDA361, H1975, A549, A498, and 786-O cells are injected s.c. into the right flank of CD1 nu/nu mice.

  • Doseringen

    ≤50 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.v. or p.o.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20068177/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20233713/

Klantproductvalidatie

SW620 and SW620:8055R cells were treated with increasing concentrations of WYE-125132 for 24 hours and cell proliferation was assayed by [<sup>3</sup>H]thymidine incorporation. Results are the mean盋oV for three biological replicates from a single experiment; identical results were obtained in n=3 experiments.

Gegevens van [ J Cell Sci , 2014 , 127(Pt 4), 788-800 ]

Sellecks WYE-125132 (WYE-132) Is geciteerd door 9 Publicaties

Suppression of MYC by PI3K/AKT/mTOR pathway inhibition in combination with all-trans retinoic acid treatment for therapeutic gain in acute myeloid leukaemia [ Br J Haematol, 2022, 10.1111/bjh.18187] PubMed: 35468223
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Expression of HYOU1 via Reciprocal Crosstalk between NSCLC Cells and HUVECs Control Cancer Progression and Chemoresistance in Tumor Spheroids [ Mol Cells, 2021, 44(1):50-62] PubMed: 33455947
An evolutionarily young defense metabolite influences the root growth of plants via the ancient TOR signaling pathway [ Elife, 2017, 6e29353] PubMed: 29231169
mTOR inhibitors activate PERK signaling and favor viability of gastrointestinal neuroendocrine cell lines [ Oncotarget, 2017, 8(13):20974-20987] PubMed: 28423496
Rapalogs can promote cancer cell stemness in vitro in a Galectin-1 and H-ras-dependent manner [ Oncotarget, 2017, 8(27):44550-44566] PubMed: 28562352
Adaptation to mTOR kinase inhibitors by amplification of eIF4E to maintain cap-dependent translation. [Cope CL, et al. J Cell Sci, 2014, 127(Pt 4):788-800] PubMed: 24363449
Deciphering Combinations of PI3K/AKT/mTOR Pathway Drugs Augmenting Anti-Angiogenic Efficacy In Vivo [Sasore T, et al PLoS One, 2014, 9(8):e105280] PubMed: 25144531
Murine dendritic cell rapamycin-resistant and rictor-independent mTOR controls IL-10, B7-H1, and regulatory T-cell induction. [ Blood, 2013, 121(18):3619-30] PubMed: 23444404

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.