PLX4032 (Vemurafenib)

Catalogusnr.S1267 Batch:S126712

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C23H18ClF2N3O3S
Molecuulgewicht 489.92 CAS-nr. 918504-65-1
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 97 mg/mL (197.99 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Vemurafenib (PLX4032, RG7204, RO5185426) is een nieuwe en potente remmer van B-RafV600E met een IC50 van 31 nM in een celvrije test. 10-voudig selectief voor B-RafV600E boven wild-type B-Raf in enzymatische tests en de cellulaire selectiviteit kan 100-voudig overschrijden. Vemurafenib (PLX4032, RG7204) induceert autophagy.
Doelen
SRMS
(Cell-free assay)		 ACK1
(Cell-free assay)		 B-Raf (V600E)
(Cell-free assay)		 C-Raf
(Cell-free assay)		 MAP4K5 (KHS1)
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
18 nM 19 nM 31 nM 48 nM 51 nM
In vitro Vemurafenib (PLX4032) remt B-RAFV600E, C-RAF, evenals wildtype B-RAF, met IC50 van respectievelijk 31 nM, 48 nM en 100 nM. Deze verbinding remt ook verschillende niet-RAF kinases, waaronder ACK1, KHS1 en SRMS, met IC50 van 18 nM tot 51 nM. In melanoomcellijnen hangt het remmende effect ervan af van de B-RAF-mutatiestatus, omdat het diegenen die B-RAF V600-mutanten bevatten, waaronder V600E, V600D, V600K en V600R, potent remt, maar niet wildtype of andere mutanten. De IC50-waarden op deze cellen, waaronder MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28 en A2058, variëren van 20 nM tot 1 μM. In deze cellen remt Vemurafenib (0,1 μM tot 30 μM) ook de fosforylering van zowel MEK1/2 als ERK1/2. Het is zeer effectief bij de behandeling van melanoom, vanwege zijn vermogen om B-RAFV600E te remmen. Deze verbinding vertoont echter een beperkt effect bij patiënten met darmkanker die ook het B-RAFV600E oncoproteïne dragen. De reden hiervoor is dat in darmkankercellen de B-RAFV600E-remming door dit middel resulteert in een snelle feedback-EGFR-activering, die de PLX4032-geremde celproliferatie compenseert.
In Vivo In B-RAFV600E-mutante muizen-xenograftmodellen remt Vemurafenib (PLX4032) (6 mg/kg–20 mg/kg) de tumorgroei. In muizen-xenograftmodellen van LOX-, Colo829- en A375-cellen remt deze verbinding (12,5 mg/kg–100 mg/kg) de tumorgroei en verlengt de overleving van de muizen.
Functies Een nieuwe en potente remmer van het B-RAFV600E oncoproteïne.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • RAF-kinaseactiviteitsmetingen

    De kinase-activiteiten van wild-type RAF en mutanten worden bepaald door de fosforylering van gebiotinyleerd-BAD-eiwit te meten in aanwezigheid van Vemurafenib (PLX4032). Voor elk enzym (0,01 ng) worden reacties van 20 μL uitgevoerd in 20 mM Hepes (pH 7,0), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0,01% (v/v) Tween-20, 50 nM biotine-BAD-eiwit en 1 mM ATP bij kamertemperatuur. Reacties worden gestopt na 5 min met 5 μL van een oplossing die 20 mM Hepes (pH 7,0), 200 mM NaCl, 80 mM EDTA, 0,3% (w/v) runder serumalbumine (BSA) bevat. De stopoplossing bevat ook phospho-BAD (Ser112) antilichaam, streptavidine-gecoate donorbeads en eiwit A-acceptorbeads. Het antilichaam en de beads worden 30 min van tevoren in de stopoplossing in het donker bij kamertemperatuur geïncubeerd. De uiteindelijke verdunning van het antilichaam is 1/2000 en de uiteindelijke concentratie van elke bead is 10 μg/mL. De assayplaten worden een uur bij kamertemperatuur geïncubeerd en vervolgens afgelezen op een PerkinElmer AlphaQuest-lezer. Mutantactiviteiten zijn het gemiddelde van twee verschillende batches gezuiverd eiwit, dubbel geanalyseerd in drie verschillende experimenten.
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28, and A2058 cells

  • Concentraties

    0–10 μM , dissolved in DMSO

  • Incubatietijd

    5 days

  • Methode

    Cellular proliferation is evaluated by MTT assay. Briefly, cells are plated in 96-well microtiter plates at a density of 1000 to 5000 cells per well in a volume of 180 μL. Vemurafenib (PLX4032) is prepared at 10 times the final assay concentration in media containing 1% DMSO. Twenty-four hours after cell plating, 20 μL of the appropriate dilution of this compound are added to plates in duplicate. The plates are assayed for proliferation 6 days after the cells are plated. Percent inhibition is calculated and the IC50 is determined from the regression of a plot of the logarithm of the concentration versus percent inhibition.
Dierstudie:

[2]
  • Dierlijke modellen

    Mice (athymic nude) xenograft models of LOX, Colo829, and A375 cells

  • Doseringen

    12.5 mg/kg–100 mg/kg

  • Toediening

    Oral gavage twice daily

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20823850/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20551065/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22281684/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15808862/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22180495/

Klantproductvalidatie

The regressing tumour microenvironment stimulates the outgrowth, infiltration and metastasis of drug-resistant clones. b, Bioluminescent signal of drug-resistant A375RTGL cells in vemurafenib-sensitive, A375 tumours, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n = 36; vemurafenib, n = 15 tumours). D, day. c, EdU incorporation in A375R-TGL cells in A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib for 4 days, as determined by FACS (vehicle, n = 8; vemurafenib, n = 6 tumours). d, Bioluminescent signal of A375R-TGL tumours alone, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n 5 38; vemurafenib, n = 15 tumours). e, Bioluminescent signal of TGLexpressing drug-resistant cancer cells (A375R, M249R4, PC9 and H2030) in drug-sensitive tumours (Colo800, LOX, UACC62, M249, H3122 and HCC827) treated with vehicle or drugs (vemurafenib, crizotinib and erlotinib) for 5 days (n (from left to right on the graph) = 6, 7, 12, 12, 9, 9, 25, 26, 9, 12, 12, 12, 16 and 11 tumours). f, Spontaneous lung metastasis by A375R cells in mice bearing A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib (10 days), visualized by BLI (n = 4).

Gegevens van [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

FRA1 downregulation during RAFi treatment drives the reactive secretome. c, Relative mRNA levels of FRA1 during vemurafenib exposure [0.1-1 uM]. d, Representative immunofluorescence staining of A375/A375R tumours for GFP (A375R, green) and FRA1 (red) after vehicle or vemurafenib treatment (5 days). DAPI, 49,6-diamidino-2-phenylindole. Scale bars, 50 um.

Gegevens van [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

The B-Raf inhibitor PLX4032 decreases cell surface DR5 levels . BCPAP cells were treated with the indicated concentrations of PLX4032 for 12 h and then harvested for extraction of cellular total RNA and subsequent RT-PCR to detection of DR5.

Gegevens van [ Oncogene , 2015 , 10.1038/onc.2015.97 ]

Acquired EGFR expression in BRAF(V600E) mutant melanoma after vemurafenib resistance. Immunohistochemical (IHC) analysis (ultraView DAB stain, brown) showing increased EGFR expression in formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) (Patient number 1-5) and frozen (Patient number 6) melanoma tissue sections from BRAF(V600E) mutant melanoma patients who developed resistance to vemurafenib, dabrafenib or trametinib as indicated. For each patient, the first biopsy is from the pre-treatment tumour; the second biopsy was performed after the tumour had progressed under treatment. For patient number 4, the first biopsy was performed when the patient was in partial response, but rapidly developed secondary resistance. Then 4.5 months later, the second biopsy was taken.

Gegevens van [ Nature , 2014 , 508(7494), 118-22 ]

Sellecks PLX4032 (Vemurafenib) Is geciteerd door 714 Publicaties

Pan-inhibition of super-enhancer-driven oncogenic transcription by next-generation synthetic ecteinascidins yields potent anti-cancer activity [ Nat Commun, 2025, 16(1):512] PubMed: 39779693
Blocking interplay between TERT and c-Myc: a new therapeutic strategy for BRAFV600E/pTERT double mutated tumors [ Int J Biol Sci, 2025, 21(11):4961-4978] PubMed: 40860184
Downregulated ALDH2 Contributes to Tumor Progression and Targeted Therapy Resistance in Human Metastatic Melanoma Cells [ Cells, 2025, 14(12)913] PubMed: 40558540
Inter-Relationship Between Melanoma Vemurafenib Tolerance Thresholds and Metabolic Pathway Choice [ Cells, 2025, 14(12)923] PubMed: 40558548
Exploiting Paradoxical Activation of Oncogenic MAPK Signaling by Targeting Mitochondria to Sensitize NRAS Mutant-Melanoma to Vemurafenib [ Int J Mol Sci, 2025, 26(6)2675] PubMed: 40141318
Acquired resistance to vemurafenib restrains thyroid cancer stem cell self-renewal by suppressing STAT3 activation [ Cell Signal, 2025, 133:111845] PubMed: 40345509
Dihydrotanshinone I enhanced BRAF mutant melanoma treatment efficacy by inhibiting the STAT3/SOX2 signaling pathway [ Front Oncol, 2025, 15:1429018] PubMed: 39944829
Suppression of Sebum Production by Vemurafenib Through Paradoxical ERK Activation Resulted in the Inhibition of the mTOR Pathway in 5α-Dihydrotestosterone-Differentiated Hamster Sebocytes In Vitro [ Exp Dermatol, 2025, 34(8):e70150] PubMed: 40817681
Selective inhibition of p300 by a novel small molecule EPS496 promotes cell death in vemurafenib-resistant BRAFV600E mutated melanoma cells [ Biochem Biophys Res Commun, 2025, 750:151382] PubMed: 39884005
Increased Mitochondrial Superoxide Level Is Partially Associated With Vemurafenib-Induced Renal Tubular Toxicity [ Basic Clin Pharmacol Toxicol, 2025, 136(4):e70015] PubMed: 40018909

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.