Torin 1

Catalogusnr.S2827 Batch:S282702

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C35H28F3N5O2
Molecuulgewicht 607.62 CAS-nr. 1222998-36-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 4 mg/mL (6.58 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Torin 1 is een krachtige remmer van mTORC1/2 met een IC50 van 2 nM/10 nM in celvrije testen; vertoont een 1000-voudige selectiviteit voor mTOR dan PI3K.
Doelen
mTORC1
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)		 DNA-PK
(Cell-free assay)		 mTORC2
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
2 nM 4.32 nM 6.34 nM 10 nM 171 nM
In vitro Torin1 remt de fosforylering van mTORC1- en mTORC2-substraten in cellen bij concentraties van respectievelijk 2 en 10 nM. Bovendien vertoont Torin1 een 1000-voudige selectiviteit voor mTOR boven PI3K (EC50 = 1800 nM) en vertoont het een 100-voudige bindingsselectiviteit ten opzichte van 450 andere proteïnekinases. Torin1 veroorzaakt celcyclusarrest via een rapamycine-resistent mechanisme dat ook onafhankelijk is van mTORC2. Torin1 verstoort mTORC1-afhankelijke fenotypes vollediger dan rapamycine. Rapamycine-resistente functies van mTORC1 zijn vereist voor cap-afhankelijke translatie. In een recente studie wordt gemeld dat Torin1 de secretie en genexpressie van neurotensine verhoogt door activering van de MEK/ERK/c-Jun-route in de menselijke endocriene cellijn BON.
In Vivo Torin1 is werkzaam in een dosis van 20 mg/kg in een U87MG xenograftmodel en toont een goede farmacodynamische remming van stroomafwaartse effectoren van mTOR in tumor- en perifere weefsels.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • mTORC1 en mTORC2 in Vitro Kinase Assays

    Om oplosbaar mTORC1 te produceren, worden HEK-293T cellijnen die stabiel N-terminaal FLAG-getagd Raptor tot expressie brengen, gegenereerd met behulp van vesiculair stomatitisvirus G-pseudogetypeerd MSCV retrovirus. Voor mTORC2 worden vergelijkbare HeLa-cellen die stabiel N-terminaal FLAG-getagd Protor-1 tot expressie brengen, gegenereerd. Beide complexen worden gezuiverd door cellen te lyseren in 50 mm HEPES, pH 7.4, 10 mm natriumpyrofosfaat, 10 mm natrium β-glycerofosfaat, 100 mm NaCl, 2 mm EDTA, 0.3% CHAPS. Cellen worden gedurende 30 min bij 4 °C gelyseerd en de onoplosbare fractie wordt verwijderd door microcentrifugatie bij 13.000 tpm gedurende 10 min. Supernatanten worden gedurende 1 uur geïncubeerd met FLAG-M2 monoklonale antilichaam-agarose en vervolgens driemaal gewassen met lysisbuffer en eenmaal met lysisbuffer die een eindconcentratie van 0.5 M NaCl bevat. Gezuiverd mTORC1 wordt geëlueerd met 100 microg/mL 3 cFLAG-peptide in 50 mm HEPES, pH 7.4, 100 mm NaCl. Eluaat kan worden gealiquoteerd en opgeslagen bij -80 °C. Substraten S6K1 en Akt1 worden gezuiverd. Kinase-assays worden gedurende 20 min bij 30 °C uitgevoerd in een eindvolume van 20 microL bestaande uit de kinasebuffer (25 mm HEPES, pH 7.4, 50 mm KCl, 10 mm MgCl 2, 500 microM ATP) en 150 ng inactief S6K1 of Akt1 als substraten. Reacties worden gestopt door toevoeging van 80 microL monsterbuffer en gedurende 5 min gekookt. Monsters worden vervolgens geanalyseerd door SDS-PAGE en immunoblotting.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    MEFs

  • Concentraties

    ~250 nM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    Cell viability is assessed with the CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay. On Day 0, 96-well plates are seeded with 500 cells per well and grown overnight. On Day 1, cells are treated with the appropriate compounds and subsequently analyzed on Days 3-5. For analysis, plates are incubated for 60 min at room temperature; 50 μL of CellTiter-Glo reagent is added to each well, and plates are mixed on an orbital shaker for 12 min. Luminescence is quantified on a standard plate luminometer.

Dierstudie:[2]
  • Dierlijke modellen

    U87MG xenograft model

  • Doseringen

    20 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.p. once daily

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19150980/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20860370/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21508335/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20508131/

Klantproductvalidatie

Huh-7.5 cells were treated with increasing concentration of Torin 1, a known autophagy inducer, and the autophagy response was assessed by measuring LC3II and p62 levels.

Gegevens van [ Am J Pathol , 2014 , 184(1), 214-29 ]

Flag-tagged SENP3 was immunoprecipitated from HeLa cells and used for in vitro phosphorylation assay with [32P]ATP with either the mock-treated or Torin1-treated mTOR/Raptor/MLST8 complex. (Upper) The samples then were subjected to SDS-PAGE, followed by autoradiography. mTOR autophosphorylation is indicated by an asterisk. (Lower) Immunopurified SENP3 was monitored by Western blotting with anti-Flag antibody.

Gegevens van [ Mol Cell Biol , 2014 , 34(24), 4474-84 ]

Representative Western blots showing LC3 in PP242 (PP) or Torin1 (Tor) treated HepG2 cells. HepG2 cells were treated with 10 uM PP242 or 0.1 uM Torin1 for 24 h.

Gegevens van [ Biochem Biophys Res Commun , 2014 , 10.1016/j.bbrc.2014.05.047 ]

Bone marrow derived macrophages were pre-treated with 10nM Torin 1 for 1h prior to LPS treatment (100 ng/ml). TNF-a production was analyzed 24h later.

, , Lim Hsiu Kim, Lina from National University of Singapore

Sellecks Torin 1 Is geciteerd door 259 Publicaties

GPNMB disrupts SNARE complex assembly to maintain bacterial proliferation within macrophages [ Cell Mol Immunol, 2025, NONE] PubMed: 40038549
DMXL1 promotes recruitment of V1-ATPase to lysosomes upon TRPML1 activation [ Nat Struct Mol Biol, 2025, 10.1038/s41594-025-01581-x] PubMed: 40527988
RNA G-quadruplexes control mitochondria-localized mRNA translation and energy metabolism [ Nat Commun, 2025, 16(1):3292] PubMed: 40195294
S100P is a ferroptosis suppressor to facilitate hepatocellular carcinoma development by rewiring lipid metabolism [ Nat Commun, 2025, 16(1):509] PubMed: 39779666
USP5 stabilizes YTHDF1 to control cancer immune surveillance through mTORC1-mediated phosphorylation [ Nat Commun, 2025, 16(1):1313] PubMed: 39900921
Dual mechanism of autophagy gene repression by PHF23 and therapeutic potential of its inhibition in protein aggregation disorders [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(22)gkaf1317] PubMed: 41359382
Excessive autophagic degradation of MYLK3 causes sunitinib-induced cardiotoxicity [ Autophagy, 2025, 1-20.] PubMed: 40568844
ESCRT III-mediated lysosomal repair improve renal tubular cell injury in cisplatin-induced AKI [ Autophagy, 2025, 1-18.] PubMed: 40152606
TBK1 is a signaling hub in coordinating stress-adaptive mechanisms in head and neck cancer progression [ Autophagy, 2025, 1-23.] PubMed: 40114316
S-palmitoylation modulates ATG2-dependent non-vesicular lipid transport during starvation-induced autophagy [ EMBO J, 2025, 44(9):2596-2619] PubMed: 40128367

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.