In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
3.000mg/ml
(12.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 60 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
3.000mg/ml
(12.03mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 60 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
(E/Z)-TG003 is een potente en ATP-competitieve Cdc2-like kinase (Clk)-remmer met een IC50 van respectievelijk 20 nM, 200 nM en 15 nM voor Clk1, Clk2 en Clk4. Geen remmend effect op Clk3, SRPK1, SRPK2 of PKC.
Doelen
mCLK4 (Cell-free assay)
mCLK1 (Cell-free assay)
mCLK2 (Cell-free assay)
15 nM
20 nM
200 nM
In vitro
TG003 remt SF2/ASF-afhankelijke splicing van humaan β-globine in vitro door onderdrukking van Clk1/Sty-gemedieerde fosforylering. TG003 remt Clk1/Sty-kinaseactiviteit in zoogdiercellen, terwijl het geen toxisch effect heeft op de groei van HeLa- en COS-7-cellen bij een concentratie van 10 μM. TG003 blokkeert de IL-1β RNA-productie door bloedplaatjes door de splicing van IL-1β heteronucleair RNA te remmen. Tijdens 3T3-L1 adipocytdifferentiatie blokkeert TG003 ook de alternatieve splicing van PKCβII en de expressie van PPARγ1 en PPARγ2.
In Vivo
TG003 (10 μM) redt de embryonale defecten die worden veroorzaakt door overmatige Clk-activiteit in Xenopus.
De kinaseactiviteit van Clks en SRPKs wordt bepaald in een reactiemengsel dat 200 mM Tris-HCl (pH 7,5), 12,5 mM MgCl2, 8 mM dithiothreitol, 4 mM EGTA, 1–20 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 1 μg synthetisch peptide van het SF2/ASF RS-domein (NH2-RSPSYGRSRSRSRSRSRSRSRSNSRSRSY-OH) en 0,1–1 μg gezuiverde kinasen bevat in een eindvolume van 40 μL. cAMP-afhankelijke proteïnekinaseactiviteit wordt bepaald in een reactiemengsel dat 80 mM Tris-HCl (pH 7,5), 12,5 mM MgCl2, 8 mM dithiothreitol, 4 mM EGTA, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg histone H1 en 1 μg gezuiverde katalytische subeenheid van ratten-cAMP-afhankelijk proteïnekinase bevat. Proteïnekinase C-activiteit wordt bepaald in een reactiemengsel dat 200 mM Tris-HCl (pH 7,5), 12,5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 80 μg/mL phosphatidylserine, 8 μg/mL dioleïne, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg histone H1 en 2 μL gedeeltelijk gezuiverd rattenproteïnekinase C bevat. De uiteindelijke concentratie van Me2SO wordt aangepast tot 1% ongeacht de remmerconcentratie. Het reactiemengsel wordt 10 minuten geïncubeerd bij 30 of 25 °C voor respectievelijk zoogdier- of Xenopus-recombinante eiwitten, en de helft wordt op een P81-fosfocellulosemembraan gespot. De kinase assay-condities, inclusief de incubatieperiode en de concentratie van kinasen en substraten, zijn geoptimaliseerd om de lineariteit tijdens incubatie te behouden. Het membraan wordt minstens 15 minuten gewassen met 5% fosforzuuroplossing (SF2/ASF RS-domein) of 5% trichloorazijnzuuroplossing (histone H1). De radioactiviteit wordt gemeten met een vloeistofscintillatieteller. De nettowaarde van de radioactiviteit wordt afgeleid door de achtergrondtelling van het reactiemengsel zonder kinase af te trekken, en de gegevens worden uitgedrukt als het percentage ten opzichte van het controlemonster dat het oplosmiddel bevat.
2 × 105 HeLa cells or 1.5 × 105 COS-7 cells resuspended in 2 mL of medium are plated on 6-well dishes, and 2 μL of 10 mM TG003 dissolved in Me2SO (final concentration at 10 μM), or 2 μL of Me2SO, is added to some wells. Cells are trypsinized, and the density is counted every 24 h for 3 days. Cells are then fixed with 1 mL of ice-cold 70% ethanol, washed with PBS, incubated in 1 ml of PBS containing 1 μg/mL DNase-free RNase A and 50 μg/mL propidium iodide for 20 min at 37 °C, and proceeded to cell cycle analysis by FACSCalibur.
Sellecks (E/Z)-TG003 Is geciteerd door 9 Publicaties
Combined therapy with DR5-targeting antibody-drug conjugate and CDK inhibitors as a strategy for advanced colorectal cancer
[ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00231-9]
A common cellular response to broad splicing perturbations is characterized by metabolic transcript downregulation driven by the Mdm2-p53 axis
[ Dis Model Mech, 2024, 17(2)dmm050356]
Proteasome Inhibitor-Induced Modulation Reveals the Spliceosome as a Specific Therapeutic Vulnerability in Multiple Myeloma
[ Nat Commun, 2020, 22;11(1):1931]
Chemically defined and growth-factor-free culture system for the expansion and derivation of human pluripotent stem cells.
[ Nat Biomed Eng, 2018, 2(3):173-182]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
