In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
4mg/ml
(8.34mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 80 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
2mg/ml
(4.17mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 40 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
SBE 13 HCl is een krachtige en selectieve PLK1-remmer met een IC50 van 200 pM, >4000-voudige selectiviteit ten opzichte van Aurora A-kinase, Plk2 en Plk3.
Doelen
PLK1
200 pM
In vitro
SBE 13 vermindert de celproliferatie in verschillende kankercellijnen en veroorzaakt een G2/M-arrest gevolgd door apoptose. In primaire cellen beïnvloedt SBE 13 de Cell Cycle en daardoor de proliferatie van primaire cellen niet. SBE13 in combinatie met Enzastaurin vertoont een synergetische vermindering van celproliferatie en een verbeterde apoptose-inductie in HCT116(p53-/-) cellen.
Om de Plk1- en Aurora A-kinaseactiviteit te bepalen, worden cellen na 13 uur vrijlating in aanwezigheid van SBE13 na een dubbele thymidineblokkade gelyseerd, en worden kinasen geïmmunoprecipiteerd uit lysaten met behulp van antilichamen zoals beschreven. Kortom, voor elke immunoprecipitatie werd 800 µg totaal eiwit geïncubeerd met respectievelijk 1,5 µg Plk1 antilichaamcocktail, 3 µg Plk2 antilichaam, 3 µg Plk3 antilichaam, of 5 µg Aurora A antilichaam, gedurende 2 uur bij 4°C op een rotator. Geïmmunoprecipiteerd eiwit wordt verzameld met behulp van Protein G Agarose kralen. De Plk1-, Plk2- en Plk3-immunoprecipitaten worden geïncubeerd met 1 µg caseïne en met 1 µCi [γ32-P]ATP gedurende 30 min bij 37°C in kinasebuffer. De Aurora A-immunoprecipitaten worden geïncubeerd met 0,5 µl Histone en met 1 µCi [γ32-P]ATP gedurende 60 min bij kamertemperatuur in kinasebuffer. Producten van de kinase-assays worden gefractioneerd op 10% Bis-Tris-polyacrylamidegels, en het gefosforyleerde substraat wordt gevisualiseerd door autoradiografie na een blootstelling van 12 tot 36 uur. Een gelijke hoeveelheid immunoprecipitaten wordt onderworpen aan western blot-analyse om een gelijke belading van Plk1-, Plk2-, Plk3- of Aurora A-eiwit in kinasereacties te bevestigen. Geïmmunoprecipiteerd Plk1 na 13 uur vrijlating in aanwezigheid van SBE13 wordt getest na defosforylering met λ-proteïnefosfatase en vergeleken met kinaseactiviteit van endogeen geïmmunoprecipiteerd Plk1. De activiteit van Plk1-kinase met en zonder defosforylering wordt vergeleken en de verhouding tussen gedefosforyleerde en “normale” endogeen geïmmunoprecipiteerde Plk1-kinaseactiviteit wordt berekend.
Cells are treated with SBE13 one day after subculturing. Control cells are incubated with normal culture medium. Concentrations of SBE13 ranged from 1 nM–100 µM. The growth rate of 1 x 105 cells per 6-well is determined by counting cells at 24, 48 and 72 hours after treatment. Cell culture studies are performed in triplicate for each time point.
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20139717/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21301227/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24810255/
Sellecks SBE 13 HCl Is geciteerd door 5 Publicaties
Inhibition of Polo-like kinase 1 (PLK1) facilitates the elimination of HIV-1 viral reservoirs in CD4 + T cells ex vivo
[ Sci Adv, 2020, 6(29):eaba1941]
SF3B1 deficiency impairs human erythropoiesis via activation of p53 pathway: implications for understanding of ineffective erythropoiesis in MDS
[ J Hematol Oncol, 2018, 11(1):19]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
