S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6]

Catalogusnr. F1711

Afdrukken

Biologische Beschrijving

Specificiteit

S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) Antibody [P14P6] detecteert endogene niveaus van totaal S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex) eiwit.
Achtergrond S100A9 + Calprotectin (S100A8/A9 complex), ook bekend als myeloïde-gerelateerde eiwitten MRP8/MRP14, is een Ca²⁺-bindend heterodimeer complex bestaande uit S100A8 en S100A9, beide leden van de S100 eiwitfamilie. Het wordt voornamelijk tot expressie gebracht in neutrofielen, monocyten en andere immuuncellen, en de expressie ervan wordt geïnduceerd onder inflammatoire en stresscondities. Structureel bevat elke subeenheid twee EF-hand Ca²⁺-bindende domeinen (een laag-affiniteit N-terminaal en een hoog-affiniteit C-terminaal) verbonden door een scharnierregio, die stabiele heterodimeren of functionele tetrameren vormen. Functioneel speelt S100A8/A9 diverse rollen in de aangeboren immuniteit en ontsteking door de regulatie van leukocyten chemotaxis, fagocyt migratie, microtubuli polymerisatie, reactieve zuurstofspecies productie en cytokine afgifte. Het bindt ook aan receptoren zoals TLR4 en RAGE, waardoor stroomafwaartse signaalroutes zoals MAPKs, PI3K/Akt, NF-κB en mTOR worden geactiveerd. Bij kanker moduleert S100A8/A9 tumorgroei, metastase, apoptose, medicijnresistentie en prognose, waardoor het een veelbelovende biomarker en therapeutisch doelwit is.

Gebruiksinformatie

Toepassing IHC Verdunning
IHC
1:1000
Reactiviteit Human
Bron Mouse Monoclonal Antibody MW
Opslagbuffer PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
Opslag
(Vanaf de datum van ontvangst)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
Experimental Protocol：
 
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
 
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
 

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37701037/

Toepassingsgegevens

IHC

Gevalideerd door Selleck

  • F1711-IHC1
    Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F1711 at 1:1000 dilution.