Refametinib (RDEA119)

Catalogusnr.S1089 Batch:S108901

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C19H20F3IN2O5S
Molecuulgewicht 572.34 CAS-nr. 923032-37-5
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (174.72 mM)
Ethanol 100 mg/mL (174.72 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Refametinib (RDEA119, Bay 86-9766) is een krachtige, ATP-onafhankelijke en zeer selectieve remmer van MEK1 en MEK2 met een IC50 van respectievelijk 19 nM en 47 nM.
Doelen
MEK1
(Cell-free assay)		 MEK2
(Cell-free assay)
19 nM 47 nM
In vitro Refametinib (RDEA119) bindt selectief en direct aan een allosterische pocket in de MEK1/2-enzymen, en is zeer werkzaam in het remmen van celproliferatie in verschillende tumorcellijnen, waaronder A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 en BxPC3. Het remt de aanhechting-afhankelijke groei van menselijke kankercellijnen die de gain-of-function V600E BRAF-mutant bevatten, met GI50-waarden variërend van 67 tot 89 nM. Onder aanhechting-onafhankelijke omstandigheden zijn de GI50-waarden voor alle geteste cellijnen vergelijkbaar (40-84 nM). Deze verbinding vertoont een weefselselectiviteit die het potentieel voor bijwerkingen gerelateerd aan het centrale zenuwstelsel vermindert. Het remt potentieel de proliferatie van de 4 cellijnen die de BRAF-mutatie bevatten, maar heeft geen of bescheiden effecten op de andere 4 cellen die wild-type BRAF bevatten (IC50 van 0,034-0,217 μM versus 1,413-34,120 μM). Het remmende effect van Refametinib in geselecteerde cellijnen OCUT1 (BRAF V600E(+), PIK3CA H1047R(+)) en SW1376 (BRAF V600E(+)) wordt versterkt door combinatie met de mTOR-remmer, temsirolimus. Het en temsirolimus vertonen ook synergetische effecten op autofagische dood van selectief geteste OCUT1- en KAT18-cellen.
In Vivo Orale toediening van RDEA119 in een dosis van 50 mg/kg eenmaal daags gedurende 14 dagen leidt tot een 68% tumorgroeiremming (TGI) in het humane melanoom A375 tumormodel. Deze verbinding in een dosis van 25 mg/kg eenmaal daags gedurende 14 dagen resulteert in een 123% TGI in het humane coloncarcinoom Colo205 tumormodel (TGI > 100% treedt op wanneer de tumor krimpt tot onder het startvolume). Een dosis van 25 mg/kg eenmaal daags gedurende 14 dagen produceert respectievelijk 56% en 67% TGI voor HT-29- en A431-tumoren.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • MEK Kinase Test

    Kinase-inactief murine ERK2 (mERK2) K52A/T183A wordt affiniteitsgezuiverd uit Escherichia coli, tot expressie gebracht met behulp van de pET21a-vector. De MEK1-kinaseactiviteit wordt bepaald met behulp van mERK2 K52A T183A als substraat. Recombinant MEK1-enzym (5 nM) wordt eerst geactiveerd door 0,02 eenheid of 1,5 nM RAF1 in aanwezigheid van 25 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0,2 mM EDTA en 50 μM ATP gedurende 30 minuten bij 25 °C. De reacties worden geïnitieerd door toevoeging van 2 μM mERK2K52A T183A en 2,5 μCi [γ-33P] ATP in een totaal volume van 20 μL. De MEK2-kinaseactiviteit wordt op vergelijkbare wijze bepaald, behalve dat activering door RAF1 niet nodig is en 11 nM MEK2-enzym (actief) in de tests wordt gebruikt. Kinaseprofilering voor Refametinib (RDEA119) wordt uitgevoerd door Invitrogen met behulp van hun Select Screen Kinase Profiling Service. De Z'-LYTE biochemische test wordt gebruikt. Deze verbinding wordt in viervoud getest bij 10 μM tegen 205 kinases.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 and BxPC3 cells

  • Concentraties

    10-1000 nM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    For anchorage-dependent growth inhibition experiments, cells are plated in white 384-well plates at 1,000/20 μL/well or white 96-well microplates at 4,000/100 μL/well. After 24-h incubation at 37 °C, 5% CO2, and 100% humidity, Refametinib (RDEA119) is incubated for 48 hours at 37 °C and assayed using CellTiter-Glo. For the 96-well anchorage-independent growth assay, wells of an “ultralow binding” plate (Corning) are filled with 60 μL of a 0.15% agarose solution in complete RPMI 1640. Then, 60 μL of complete RPMI 1640 containing 9,000 cells in 0.15% agarose are added per well. After 24 hour, 60 μL of a 3 × drug solution in agarose-free complete RPMI 1640 are added. After 7 d, 36 μL of 6 × 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium, inner salt reagent are added per well. After 2 hours at 37 °C, absorbance at 490 nm is determined on the M5 plate reader.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Female athymic nude mice are injected s.c. with A375, HT-29 and A431 tumor; male athymic nude mice with Colo205 tumor.

  • Doseringen

    25 or 50 mg/kg

  • Toediening

    Orally once daily for 14 days

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19706763/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21351275/

Klantproductvalidatie

RDEA119 (1 µM) or JTP-74057 (0.1 µM) abolished the effects of G1 on DAPK1 and NR2B phosphorylation.

Gegevens van [ , , J Neurosci, 2012, 32(14): 4887-900 ]

Western blot analyses of downstream effector proteins of the MAPK signaling pathway. The panel of CRC cell lines was treated with or without refametinib (1 lM) for 72 h. a-Tubulin served as a loading control.

Gegevens van [ , , Mol Oncol, 2018, 12(8):1398-1409 ]

B: ERK and p-ERK1/2 levels in response to MEKi treatment. Tra = trametinib, Ref = refametinib, Sel = selumetinib, Bin = binimetinib. Films were intentionally overexposed to detect signal in lanes with low p-ERK1/2 expression. For each cell line all treatment conditions were performed as part of the same experiment. All experimental findings were confirmed in independent experiments performed in triplicate. Note: membranes incubated with p-ERK1/2 antibody were overexposed to capture all remaining signal after MEKi treatment. WB images have been cut to keep the same sample order. All membranes incubated with the same antibody have been exposed for the same period of time.

Gegevens van [ , , Am J Cancer Res, 2016, 6(10):2235-2251 ]

MEK inhibition of hypoosmolar-induced ADM. In all panels KrasG12D acinar explants were isolated and starved overnight. The next day explants were incubated with hypoosmotic (150 mOsm) medium for 5 min and then refametinib was added at the indicated concentrations. (A) HRP assay from two mice was performed immediately after the 5 min hypoosmotic treatment. Mean ± SD, two-tailed t-test. (B) Acinar explants were seeded in collagen and ADM was quantified at day 4. N = number of mice. Mean ± SD, two-tailed t-test. (C) Representative bright field images of acinar explants described in B. Dashed lines highlight acinar cell clusters, arrowheads: duct-like structures. Scale bars = 50 μm.

Gegevens van [ , , EBioMedicine, 2017, 15:90-99 ]

Sellecks Refametinib (RDEA119) Is geciteerd door 29 Publicaties

System analysis links SMARCD3 regulons to growth signaling and MEK inhibitor response in everolimus-resistant ER+ breast cancer cells [ Cell Rep Med, 2025, 6(11):102425] PubMed: 41260207
Histone deacetylase inhibitors promote breast cancer metastasis by elevating NEDD9 expression [ Signal Transduct Target Ther, 2023, 8(1):11] PubMed: 36604412
Salmonella effector SopB reorganizes cytoskeletal vimentin to maintain replication vacuoles for efficient infection [ Nat Commun, 2023, 14(1):478] PubMed: 36717589
Signaling-induced systematic repression of miRNAs uncovers cancer vulnerabilities and targeted therapy sensitivity [ Cell Rep Med, 2023, S2666-3791(23)00367-1] PubMed: 37734378
Signaling-induced systematic repression of miRNAs uncovers cancer vulnerabilities and targeted therapy sensitivity [ Cell Rep Med, 2023, 4(10):101200] PubMed: 37734378
Protein Tyrosine Phosphatase Non-Receptor 11 (PTPN11/Shp2) as a Driver Oncogene and a Novel Therapeutic Target in Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC) [ Int J Mol Sci, 2023, 24(13)10545] PubMed: 37445722
Anatomic position determines oncogenic specificity in melanoma [ Nature, 2022, 604(7905):354-361] PubMed: 35355015
NOTCH signaling limits the response of Low Grade Serous Ovarian Cancers to MEK inhibition [ Mol Cancer Ther, 2022, MCT-22-0004] PubMed: 36198031
Secondary resistance to anti-EGFR therapy by transcriptional reprogramming in patient-derived colorectal cancer models [ Genome Med, 2021, 13(1):116] PubMed: 34271981
Targeting the PI3K and MAPK pathways to improve response to HER2-targeted therapies in HER2-positive gastric cancer [ J Transl Med, 2021, 19(1):184] PubMed: 33933113

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.