Gedatolisib (PKI-587)

Catalogusnr.S2628 Batch:S262805

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C32H41N9O4
Molecuulgewicht 615.73 CAS-nr. 1197160-78-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 2 mg/mL (3.24 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Gedatolisib (PKI-587) is een zeer potente duale remmer van PI3Kα, PI3Kγ en mTOR met IC50 van respectievelijk 0,4 nM, 5,4 nM en 1,6 nM in celvrije assays. Deze verbinding bevindt zich momenteel in fase 2.
Doelen
PI3Kα
(Cell-free assay)		 mTOR
(Cell-free assay)		 PI3Kγ
(Cell-free assay)
0.4 nM 1.6 nM 5.4 nM
In vitro Gedatolisib (PKI-587) vertoont potente remmende activiteit tegen PI3K-α, PI3K-γ en mTOR met IC50 van respectievelijk 0,4 nM, 5,4 nM en 1,6 nM. Bovendien vertoont het ook potentie tegen de meest voorkomende mutante vormen van PI3Kα, met name de H1047R en E545K met IC50 van respectievelijk 0,6 nM en 0,6 nM. Gecorreleerd met de onderdrukking van de fosforylering van PI3K/mTOR-signaalroute-eiwitten, veroorzaakt deze verbinding groeiremming van tumorcellen in MDA-361- en PC3-MM2-cellijnen met IC50 van respectievelijk 4 nM en 13,1 nM.
In Vivo Gedatolisib (PKI-587)-behandeling met 25 mg/kg intraveneus bij naakte muizen leidt tot een lage plasmaklaring (7 (mL/min)/kg), een hoog distributievolume (7,2 L/kg) en een lange halfwaardetijd (14,4 uur). In het MDA-361 xenograftmodel produceert het een potente antitumorale werkzaamheid met de minimaal effectieve dosis (MED) van 3 mg/kg tegen MDA-361 tumoren en de maximaal getolereerde enkele dosis (MTD) van 30 mg/kg. Terwijl in het H1975 (niet-kleincellige longcarcinoom, mutante EGFR [L858R, T790M]) xenograftmodel, deze verbinding bij 25 mg/kg gedurende 7 weken resulteert in 90% overleving van de behandelde groep.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • PI3K en mTOR kinase assay

    Enzymassays worden uitgevoerd in fluorescentiepolarisatie (FP) formaat, aangepast van het Echelon K-1100 PI3K FP assay kit protocol. Humane klasse I PI3K's en PI3K-α mutanten (E545K en H1047R) worden geproduceerd in Sf9 of gekocht bij Upstate Biotech. GST-GRP1 (murine) wordt geproduceerd in Escherichia coli en geïsoleerd door GST-Sepharose. Assaybuffers zijn reactiebuffer [20 mM HEPES (pH 7.1), 2 mM MgCl2, 0.05% CHAPS, en 0.01% β-mercaptoethanol] en stop/detectiebuffer [100 mM HEPES (pH 7.5), 4 mM EDTA, 0.05% CHAPS]. De FP-reactie wordt gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur uitgevoerd in 20 μL reactiebuffer die 20 μM fosfatidylinositol 4,5-bisfosfaat (PIP2), 25 μM ATP, en <4% DMSO bevat. De FP-reactie wordt gestopt met 20 μL stop/detectiebuffer (10 nM probe en 40 nM GST-GRP), en na 2 uur worden gegevens verzameld met behulp van een Envision plaatlezer. De routinematige assays met gezuiverde FLAG-TOR (FL en 3.5) worden uitgevoerd in 96-well platen als volgt. Enzymen worden eerst verdund in kinase assay buffer (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerofosfaat, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 μM microcystin LR, en 100 μg/mL BSA). Aan elke put wordt 12 μL van het verdunde enzym kort gemengd met 0.5 μL testremmer of controlevoertuig dimethylsulfoxide (DMSO), waarbij de testremmer Gedatolisib (PKI-587) is. De kinasereactie wordt geïnitieerd door 12.5 μL kinase assay buffer toe te voegen die ATP en His6-S6K bevat om een finaal reactievolume van 25 μL te geven dat 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP, en 1.25 μM His6-S6K bevat. De reactieplaat wordt gedurende 2 uur geïncubeerd (lineair bij 1-6 uur) bij kamertemperatuur met zacht schudden en vervolgens beëindigd door 25 μL Stop buffer toe te voegen (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA, en 20 mM EGTA).
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    MDA-361 and PC3-MM2

  • Concentraties

    0-10 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    Cells are plated in 96-well culture plates at about 3000 cells per well. One day following plating, Gedatolisib (PKI-587) is added to cells. Three days after treatment with this compound, viable cell densities are determined by measuring metabolic conversion (by viable cells) of the dye MTS, a previously established cell proliferation assay. For each assay, MTS and PMS stocks are freshly thawed and mixed (MTS/PMS, 20:1). The MTS/PMS mixture is then added to 96-well cell plates at 20 μL/well, and plates are incubated for 1 hour–2 hours in cell culture incubator. MTS assay results are read in a 96-well format plate reader by measuring absorbance at 490 nm. The effect of each treatment is calculated as a percentage of control cell growth obtained from vehicle-treated cells grown in the same culture plate.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    MDA-361 and H1975 cells are injected subcutaneously into the nude mice.

  • Doseringen

    ≤30 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.v.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20166697/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22261591/

Klantproductvalidatie

PI3K inhibitors promote apoptosis in checkpoint-defective cell lines. Two checkpoint-functional (A2058, D28) and three defective (HT144, D20, SKMel13) melanoma cell lines growth as tumour spheres as in Figure 4B were either untreated or treated with 5 uM PF-05212384 for 72 h, harvested and immunoblotted for pAkt Ser473.

Gegevens van [ Pigment Cell Melanoma Res , 2014 , 27(5), 813-21 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h,A549 cells incubated with the indicated concentrations of PKI-587 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks Gedatolisib (PKI-587) Is geciteerd door 31 Publicaties

Efficacy of NAMPT inhibition in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ PLoS One, 2025, 20(6):e0324443] PubMed: 40526635
Bypassing cisplatin resistance in Nrf2 hyperactivated head and neck cancer through effective PI3Kinase targeting [ bioRxiv, 2025, 2025.01.10.632413] PubMed: 39868226
AKT1 phosphorylation of cytoplasmic ME2 induces a metabolic switch to glycolysis for tumorigenesis [ Nat Commun, 2024, 15(1):686] PubMed: 38263319
A multiplex single-cell RNA-Seq pharmacotranscriptomics pipeline for drug discovery [ Nat Chem Biol, 2024, ] PubMed: 39482470
Assessments of prostate cancer cell functions highlight differences between a pan-PI3K/mTOR inhibitor, gedatolisib, and single-node inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR pathway [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13703] PubMed: 39092562
Functional Assessments of Gynecologic Cancer Models Highlight Differences Between Single-Node Inhibitors of the PI3K/AKT/mTOR Pathway and a Pan-PI3K/mTOR Inhibitor, Gedatolisib [ Cancers (Basel), 2024, 16(20)3520] PubMed: 39456616
Selective Eradication of Colon Cancer Cells Harboring PI3K and/or MAPK Pathway Mutations in 3D Culture by Combined PI3K/AKT/mTOR Pathway and MEK Inhibition [ Int J Mol Sci, 2023, 24(2)1668] PubMed: 36675180
RECOVER identifies synergistic drug combinations in vitro through sequential model optimization [ Cell Rep Methods, 2023, 3(10):100599] PubMed: 37797618
In Vitro Angiogenesis Inhibition and Endothelial Cell Growth and Morphology [ Int J Mol Sci, 2022, 23(8)4277] PubMed: 35457095
Fibroblast-Induced Paradoxical PI3K Pathway Activation in PTEN-Competent Colorectal Cancer: Implications for Therapeutic PI3K/mTOR Inhibition [ Front Oncol, 2022, 12:862806] PubMed: 35719951

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.