Neratinib (HKI-272)

Catalogusnr.S2150 Batch:S215005

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C30H29ClN6O3
Molecuulgewicht 557.04 CAS-nr. 698387-09-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 6 mg/mL (10.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Neratinib is een zeer selectieve HER2- en EGFR-remmer met een IC50 van 59 nM en 92 nM in celvrije assays; het remt zwak KDR en Src, geen significante remming van Akt, CDK1/2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf en c-Met. Fase 3.
Doelen
HER2
(Cell-free assay)		 EGFR
(Cell-free assay)		 KDR
(Cell-free assay)		 Src
(Cell-free assay)
59 nM 92 nM 800 nM 1.4 μM
In vitro Neratinib remt zwak de tyrosinekinasen KDR en Src met een IC50 van respectievelijk 0,8 μM en 1,4 μM, wat 14- en 24-voudig minder actief is in vergelijking met HER2. Deze verbinding vertoont geen activiteit tegen andere serine-threoninekinasen zoals Akt, cycline D1/cdk4, cycline E/cdk2, cycline B1/cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf en Tpl-2, evenals het tyrosinekinase c-Met. Het remt selectief de proliferatie van 3T3-cellen getransfecteerd met de HER2 (3T3/neu), evenals twee andere HER-2-overexpresserende SK-Br-3- en BT474-cellen met IC50-waarden van 2-3 nM, wat een >230-voudige potentie vertoont in vergelijking met niet-getransfecteerde 3T3-cellen, evenals MDA-MB-435 en SW620 die EGFR- en HER2-negatief zijn. Deze chemische stof remt ook de proliferatie van EGFR-afhankelijke A431-cellen met een IC50 van 81 nM. Het vermindert HER2-receptorautofosforylering in BT474-cellen met een IC50 van 5 nM, en EGF-afhankelijke fosforylering van EGFR in A431-cellen met een IC50 van 3 nM. Blokkeren van HER-2 door deze verbinding resulteert in remming van stroomafwaartse MAPK- en Akt-routes met een IC50 van 2 nM, krachtiger dan Trastuzumab. Het remt de cycline D1-expressie en de fosforylering van de Rb-susceptibiliteitsgenproductie in BT474-cellen met een IC50 van 9 nM, wat leidt tot G1-S-arrestatie en uiteindelijk verminderde celproliferatie.
In Vivo Orale toediening van Neratinib remt significant de groei van 3T3/neu-xenografts, met een remming van respectievelijk 34%, 53%, 98% en 98% bij een dosis van 10, 20, 40 en 80 mg/kg/dag. In overeenstemming met de remming van HER-2-fosforylering met 84% binnen 1 uur na toediening van 40 mg/kg/dag, remt deze verbinding de groei van BT474-xenografts met respectievelijk 70-82%, 67% en 93% bij een dosis van 5, 10 en 40 mg/kg/dag. Het is ook effectief tegen SK-OV-3-xenografts met een remming van 31% en 85% bij respectievelijk 5 en 60 mg/kg/dag. Deze chemische stof is minder potent tegen EGFR-afhankelijke A431-xenografts dan tegen HER-2-afhankelijke tumoren, met respectievelijk 32% en 44% remming bij 5 en 20 mg/kg/dag. Het vertoont weinig activiteit tegen MCF-7- en MX-1-xenografts die lage niveaus van HER-2 en EGFR tot expressie brengen, met slechts 28% remming bij 80 mg/kg/dag, wat suggereert dat het een selectieve activiteit heeft voor cellen die HER-2 of EGFR tot expressie brengen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Celvrije autofosforyleringsassay met behulp van tijdsopgeloste fluorometrie

    Neratinib wordt bereid als 10 mg/mL stamoplossingen in DMSO en verdund in 25 mM HEPES (pH 7,5; 0,002 ng/mL-20 μg/mL). Gezuiverde recombinante COOH-terminale fragmenten van HER2 (aminozuren 676-1255) of epidermale groeifactorreceptor (EGFR) (aminozuren 645-1186) [verdund in 100 mM HEPES (pH 7,5) en 50% glycerol] worden geïncubeerd met toenemende concentraties van deze verbinding in 4 mM HEPES (pH 7,5), 0,4 mM MnCl2, 20 μM natriumvanadaat en 0,2 mM DTT gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur in 96-well ELISA-platen. De kinasereactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van 40 μM ATP en 20 mM MgCl2 en gedurende 1 uur bij kamertemperatuur voortgezet. Platen worden gewassen en fosforylering wordt gedetecteerd met Europium-gelabelde anti-fosfo-tyrosine-antilichamen (15 ng/well). Na was- en versterkingsstappen wordt het signaal gedetecteerd met een Victor2-fluorescentielezer (excitatiegolflengte 340 nm, emissiegolflengte 615 nm). De concentratie van deze chemische stof die de receptorfosforylering met 50% remt (IC50) wordt berekend uit de remmingscurven.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    3T3, 3T3/neu, A431, BT474, SK-Br-3, MDA-MB-435, and SW480

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentrations 0.5 ng/mL-5 μg/mL

  • Incubatietijd

    2 or 6 days

  • Methode

    Cells are exposed to various concentrations of Neratinib for 2, or 6 days. Cell proliferation is determined using sulforhodamine B, a protein binding dye. Briefly, cells are fixed with 10% trichloroacetic acid and washed extensively with water. Cells are then stained with 0.1% sulforhodamine B and washed in 5% acetic acid. Protein-associated dye is solubilized in 10 mM Tris, and absorbance is measured at 450 nM. The concentration of this compound that inhibits cell proliferation by 50% (IC50) is determined from inhibition curves.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    Female athymic (nude) mice implanted s.c. with 3T3/neu, BT474, MCF-7, or SK-OV-3 cells

  • Doseringen

    ~80 mg/kg/day

  • Toediening

    Gavage

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15173008/

Klantproductvalidatie

<p>HER2 mutations V777L, D769H, V842I, G309A induce gain-of-function over HER2 WT in MCF10A mammary epithelial cells. B, HER2 WT, L755S, and del.755–759 cells were grown in Matrigel in the presence of DMSO vehicle (0.5%), neratinib (0.5  μmol/L) or gefitinib (0.5  μmol/L). Phase contrast images were obtained as in A. C,  MCF10A-HER2 WT or mutants were seeded in soft agar. After 7 days of growth, they were treated with DMSO vehicle (0.5%), lapatinib (0.5 μmol/L) or neratinib (0.5 μmol/L) for an additional week. Error bars represent 95% highest posterior density intervals. *, Significant difference between the HER2 mutant and HER2 WT; #, the effect of inhibitor treatment was significant (95% highest posterior density interval did not contain 0 for both).  D, photomicrographs of the colonies in soft agar on day 12, magnification ×40. </p>

Gegevens van [ Cancer Discov , 2013 , 3, 224-37 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. A, HKI-272 induces cell death in GBM cells with EGFR EC mutation (SKMG3, SF268) but not EGFR wild-type (WT EGFR) cancer cell lines or astrocytes (NHA). Cell death was assessed by trypan blue exclusion after 5 days of inhibitor treatment. Cells lines in black express wild-type EGFR, whereas those in red contain EGFR EC mutations.</div>

Gegevens van [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

<p> </p><div>Differential sensitivity of EGFR-mutant glioma and lung cancer cell lines to the irreversible EGFR inhibitors HKI-272 and CI-1033. C, HKI-272 is more potent than CI-1033 in blocking EGFR phosphorylation in SKMG3 cells with EGFR EC mutation. SKMG3 cells were treated with the indicated doses of CI-1033 or HKI-272, and whole lysates were analyzed by immunoblot with the indicated antibodies.</div>

Gegevens van [ Cancer Discov , 2012 , 2, 458-471 ]

(C, D) Cells were treated as mentioned above for the indicated times and processed for immunofluorescence experiments with anti-ErbB2 antibody (green). Nuclei were stained with DAPI (blue). Examples of intracellular ErbB2 punctae are indicated with yellow triangles. Scale bar = 10 μm.

Gegevens van [ , , Cancer Lett, 2016, 382(2):176-185 ]

Sellecks Neratinib (HKI-272) Is geciteerd door 116 Publicaties

APOBEC3 mutagenesis drives therapy resistance in breast cancer [ Nat Genet, 2025, 57(6):1452-1462] PubMed: 40379787
Sevabertinib, a Reversible HER2 Inhibitor with Activity in Lung Cancer [ Cancer Discov, 2025, 10.1158/2159-8290.CD-25-0605] PubMed: 41090369
Small molecule kinase inhibitor altiratinib inhibits brain cyst forming bradyzoites of Toxoplasma gondii [ J Microbiol, 2025, 63(2):e2409001] PubMed: 40044130
KinoViz: A User-Friendly Web Application for High-Throughput Kinome Profiling Analysis and Visualization in Cancer Research [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-6431257] PubMed: 40630533
Hotspot mutations in HER2 interfaces destabilize structure, causing breast cancer treatment failure [ Res Sq, 2025, rs.3.rs-5931887] PubMed: 40166021
Proteogenomic analysis dissects early-onset breast cancer patients with prognostic relevance [ Exp Mol Med, 2024, 56(11):2382-2394] PubMed: 39482530
Peptidylarginine deiminase 3 modulates response to neratinib in HER2 positive breast cancer [ Oncogenesis, 2024, 13(1):30] PubMed: 39097594
Patient-derived rhabdomyosarcoma cells recapitulate the genetic and transcriptomic landscapes of primary tumors [ iScience, 2024, 27(10):110862] PubMed: 39319271
Synergistic Effects of Neratinib in Combination With Palbociclib or Miransertib in Brain Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(3):492-505] PubMed: 38751701
The Combination of Afatinib With Dasatinib or Miransertib Results in Synergistic Growth Inhibition of Stomach Cancer Cells [ World J Oncol, 2024, 15(2):192-208] PubMed: 38545471

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.