Monastrol

Monastrol remt de progressie door de S- en G2-fasen van de celcyclus of de centrosome-duplicatie niet. De mitotische arrestatie als gevolg van deze verbinding is ook snel omkeerbaar. Het remt ook de vorming van bipolaire spoelfiguren in Xenopus-eiextracten. Deze chemische stof arresteert cellen in mitose met monoastrale spoelfiguren bestaande uit een radiale reeks microtubuli omgeven door een ring van chromosomen, terwijl het de microtubuli in interfasecellen of microtubuli-polymerisatie in vitro niet beïnvloedt[1]. Blootstelling van gekweekte sympathische neuronen aan deze verbinding gedurende een paar uur verhoogt zowel het aantal als de groeisnelheid van de axonen. Na extra tijd zijn de totale lengtes van de axonen niet te onderscheiden van controles. Sensorische neuronen vertonen een vergelijkbare kortetermijnstijging van de axonale groeisnelheid. Langdurige blootstelling resulteert echter in kortere axonen, wat suggereert dat sensorische neuronen gevoeliger kunnen zijn voor toxische effecten van het medicijn. Niettemin is de algehele gezondheid van de culturen nog steeds veel robuuster dan culturen behandeld met taxol, een medicijn dat vaak wordt gebruikt voor chemotherapie[2]. In HeLa-cellen activeert deze verbinding het spoelfiguurcheckpoint, wat leidt tot mitotische arrestatie en apoptose[3].

• Cellijnen

  BS-C-1 (monkey epithelial kidney) cells

• Concentraties

  100 μM

• Incubatietijd

  4 h

• Methode

  For the double thymidine arrest, exponentially growing BS-C-1 cells are cultured for 16 h in normal growth medium containing 2 mM thymidine. After this, the cells are released into normal growth medium supplemented with 24 μM deoxycytidine for 9 h. The second thymidine block is imposed for 16 h during which the cells were maintained in serum-free medium containing 2 mM thymidine. Finally, the cells are released into normal growth medium containing 24 μM deoxycytidine to which is added either 100 μM monastrol or 0.1% DMSO. To assess the reversibility of the effect of this compound and nocodazole treatment, BS-C-1 cells plated on coverslips are treated for 4 h in normal growth medium containing either 2 μM nocodazole or 100 μM this chemical and then released into normal medium. At the different time points, coverslips are processed for immunofluorescence and the cells in interphase or mitosis are counted and categorized.