CC-5013 (Lenalidomide)

Lenalidomide induceert sterk IL-2 en sIL-2R productie. Deze door de verbinding geïnduceerde tyrosinefosforylatie van CD28 op T-cellen wordt gevolgd door een stroomafwaartse activering van NF-κB. [2]

Deze verbinding en pomalidomide remmen autoubiquitinatie van CRBN in HEK293 T-cellen die thalidomide-bindend competent wild-type CRBN tot expressie brengen, maar niet thalidomide-bindend defectief CRBN(YW/AA). Overexpressie van CRBN wild-type eiwit, maar niet CRBN(YW/AA) mutant eiwit, in KMS12 myeloomcellen, versterkt pomalidomide-gemedieerde reducties in c-myc en IRF4 expressie en verhoogt p21(WAF-1) expressie. Langdurige selectie voor resistentie tegen deze verbinding in H929 myeloomcellijnen gaat gepaard met een reductie in CRBN, terwijl in DF15R myeloomcellen die resistent zijn tegen zowel pomalidomide als deze chemische stof, CRBN-eiwit ondetecteerbaar is. [3]

Deze chemische stof voorkomt de inductie van defecten door de expressie van tumorcelremmende moleculen te downreguleren. Het voorkomt de inductie van tumor-geïnduceerde T-cel lytische synapsdysfunctie. Deze verbindingbehandeling blokkeert door CLL-cellen geïnduceerde T-cel actine synapsdysfunctie, bootst antilichaamblokkade na en downreguleert de expressie van CLL-remmende liganden en hun receptoren op T-cellen. Deze behandeling voorkomt tumor-geïnduceerde immuunsuppressie in FL, DLBCL, HL, MM, SCC en OC en downreguleert immunosuppressieve ligandexpressie op alle onderzochte tumorcellen. De CTL-doodfunctie neemt significant toe na antilichaamblokkade van CLL-remmende liganden of deze chemische behandeling vergeleken met controlebehandelingen. Behandeling van autologe CLL-T-cel co-culturen met dit middel keert de verminderde CD8⁺ T-cel lytische synapsvorming en granzyme B-trafficking om. [4]

De inductie van angiogenese door bFGF wordt significant geremd door orale behandeling met Lenalidomide op een dosisafhankelijke manier. Deze verbinding vermindert significant het percentage gevasculariseerd gebied van 5,16% (controlegroep) tot 2,58% (50 mg/kg). Het vermindert significant de berekende totale MVL van 21,07 (controle) tot 8,11 (50 mg/kg). Deze chemische stof remt significant de migratie van HUVEC's door de fibronectine-gecoate membranen naar 0,1 ng/mL bFGF bij 100 μM, 1 ng/mL VEGF bij concentraties van 10 μM en 100 μM. [5]

• Analyse voor remming van TNF-synthese door humane PBMC's

  Humane PBMC's van normale donoren worden verkregen door Ficoll-Hypaque dichtheidsgradientcentrifugatie. Cellen (10⁶ cellen/mL) worden gekweekt in RPMI aangevuld met 10 AB+ serum, 2 mM L-glutamine, 100 U/mL penicilline en 100 μg/mL streptomycine. Lenalidomide wordt opgelost in DMSO bij 20 mg/mL; verdere verdunning gebeurt met kweekmedium. De uiteindelijke DMSO-concentratie in alle analyses, inclusief de controles, is 0,25%. Deze verbinding wordt 1 uur voorafgaand aan de toevoeging van LPS aan cellen toegevoegd. PBMC's (10⁶ cellen/mL) worden gestimuleerd met 1 μg/mL LPS van Salmonella minnesota R595. Cellen, in drievoud, worden gedurende 18-20 uur bij 37 °C in 5% CO₂ met LPS geïncubeerd. Supernatanten worden vervolgens geoogst en geanalyseerd op cytokineniveaus. In sommige experimenten worden supernatanten tot gebruik bij -70 °C ingevroren. De cellevensvatbaarheid wordt bepaald door de Trypanblauwe exclusiekleurstofmethode. De concentratie van TNFα in de kweeksupernatanten wordt bepaald door ELISA. Deze chemische stof wordt in minimaal drie afzonderlijke experimenten getest. Het percentage remming wordt bepaald als 100 × [1 - (cytokine(experimenteel)/cytokine(controle))].

• Dierlijke modellen

  Adult male Sprague-Dawley rats bearing HUVECs cells

• Doseringen

  50 mg/kg and 250 mg/kg

• Toediening

  Administered via i.p.