In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
G-749 is een nieuwe en potente FLT3-remmer met een IC50 van 0,4 nM, 0,6 nM en 1 nM voor respectievelijk FLT3 (WT), FLT3 (D835Y) en Mer, wat een lagere potentie tegenover andere tyrosinkinasen aantoont.
In FLT3-WT-dragende RS4-11-cellen en FLT3-ITD-bevattende MV4-11- en Molm-14-cellen remt G-749 krachtig de autofosforylering van FLT3 met een IC50 van ≤8 nM. In leukemiecellen vertoont deze verbinding antiproliferatieve activiteit door apoptose te induceren. In BaF3-cellijnen die stabiel FLT3-ITD/N676D, FLT3-ITD/F691L, FLT3-D835Y of FLT3-D835Y/N676D tot expressie brengen, vertoont het een sterke remmende activiteit met een IC50 van <10 nM, en overwint zo de medicijnresistentie. In blasten van AML-patiënten vertoont deze chemische stof ook een krachtige antileukemieactiviteit.
In Vivo
In MV4-11 xenograftmuizen remt G-749 (30 mg/kg p.o.) effectief de FLT3-route en remt het significant de tumorgroei. In een orthogonaal model van beenmergengraftment met Molm-14-cellen remt deze verbinding (20 mg/kg p.o.) ook de tumorgroei en verhoogt het de overleving.
Activiteitsassays worden uitgevoerd met behulp van Lance Ultra time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) technologie van Perkin-Elmer. Kortom, 10 ng/mL FLT3-enzym, een serieel verdund G-749, 80 nM substraat van ULight-poly-GT-peptide en variabele hoeveelheden ATP (8,5 µM tot 1088 μM) worden gemengd in kinase-assaybuffer (50 mM HEPES pH 7.5, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 2 mM DTT en 0.01% Tween-20) en worden toegevoegd aan een 384-wells OptiPlate-384 in een volume van 10 μL. Kinase-reacties worden tot 1 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd en vervolgens gestopt door de toevoeging van 5 μL 10 mM EDTA. Een volume van 5 μL van de specifieke Eu-gelabelde anti-fosfopeptide-antilichaam verdund in LANCE Detection Buffer wordt vervolgens toegevoegd tot een uiteindelijke concentratie van 2 nM. Na 30 minuten incubatie worden de assayplaten geïncubeerd bij 23°C en wordt het LANCE-signaal gemeten op een EnVision Multilabel Reader. De excitatiegolflengte wordt ingesteld op 320 nm en de emissie wordt gemonitord op 615 nm (donor) en 665 nm (acceptor). De IC50 wordt berekend met behulp van niet-lineaire regressieanalyse met GradPad Prism 5.
Cells are seeded at a density of 2 ×104 cells per well and treated with the indicated concentrations of this compound for 72 hours at 37℃. The conditioned medium (CM) is prepared from HS-5 cell culture for 5 days under routine culture conditions, clarified by centrifugation, and used immediately. The CM is added to complete medium at a final concentration of 35%. In coculture experiments, 5 ×104 AML blast cells are plated in 24-well plates containing 1 ×104 HS-5 monolayers and then cultured for at least 48 hours before the exposure of inhibitors. Cell viability is determined by an ATPLite assay.
MV4-11 xenograft mouse model and Molm-14 orthogonal mouse model
Doseringen
~30 mg/kg
Toediening
p.o.
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24532805/
Sellecks G-749 Is geciteerd door 1 Publicatie
G-749 Promotes Receptor Tyrosine Kinase TYRO3 Degradation and Induces Apoptosis in Both Colon Cancer Cell Lines and Xenograft Mouse Models
[ Front Pharmacol, 2021, 12:730241]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
