EI1

Catalogusnr.S7611 Batch:S761101

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C23H26N4O2
Molecuulgewicht 390.48 CAS-nr. 1418308-27-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 42 mg/mL (107.55 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.260mg/ml (0.67mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 5.2 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.260mg/ml (0.67mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 5.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving EI1 is een potente en selectieve EZH2-remmer met een IC50 van respectievelijk 15 nM en 13 nM voor EZH2 (WT) en EZH2 (Y641F).
Doelen
EZH2 (Y641F)
(Cell-free assay)		 Ezh2 (wild-type)
(Cell-free assay)
13 nM 15 nM
In vitro In DLBCL-cellen remt EI1 de cellulaire H3K27-methylering en activeert het de expressie van Ezh2-doelgen p16. In muizen-embryonale fibroblasten remt deze verbinding ook H3K27me3 en celproliferatie. Bovendien remt het selectief de groei van DLBCL-cellen die de Ezh2-mutatie dragen, en veroorzaakt het celcyclusarrest en apoptose.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Biochemische test

    Voor de IC50-bepaling wordt EI1 drievoudig serieel verdund in DMSO voor een totaal van 12 concentraties, met een startconcentratie van 1 μM. De reactie wordt 120 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd en gestopt door het toevoegen van een quench-oplossing (2,5% TFA met 320 nM d4-SAH). De SAH-productie wordt gekwantificeerd met behulp van een API 4000 triple quadrupool massaspectrometer met Turbulon Spray gekoppeld aan Prominence UFLC. Het percentage remming wordt genormaliseerd met behulp van positieve (geen remmer) en negatieve (geen enzym) controles, en de IC50 wordt berekend met PRISM. Enzymologiestudies van S-Adenosyl methionine (SAM) competitie worden uitgevoerd met een lichte aanpassing van de reactieconditie: 10 μM van deze verbinding wordt gebruikt als startdosis voor seriële verdunning. SAM wordt getitreerd over een bereik tussen 1 μM en 50 μM (corresponderend met 1 × Km en 50 × Km), en substraatpeptide is aanwezig in het uiteindelijke reactiemengsel in zijn verzadigde toestand (10 μM). Voor Histone Methyltransferase (HMT) profilering in Tabel 1 zijn alle HMT's gezuiverde recombinante eiwitten van ofwel Escherichia coli ofwel het Baculovirus-systeem. Het katalytische domein van G9a, SuV39H2, Set7/9, CARM1, SETD8, NSD3, SETD2 en Dot1L, en het volledige SmyD2-eiwit werden gebruikt in de biochemische assays. HMT biochemische reacties worden zorgvuldig gekarakteriseerd met enzymologiestudies en de SAM en substraat Km bepaald. De SAM- en substraatconcentraties worden op hun respectievelijke Km gehouden voor de meeste HMT's, behalve die (SmyD2 en Set7/9) met een lage SAM-Km-waarde, waarvoor 0,5 μM SAM wordt gebruikt. Alle HMT-reacties worden uitgevoerd met hetzelfde assayformaat waarbij de productie van SAH uit de biochemische reactie wordt gekwantificeerd door LC-MS.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    Ezh2 mutant DLBCL cells (WSU-DLCL2, SU-DHL6, Karpas422, DB, and SU-DHL4), Ezh2 wild-type DLBCL cells (OCI-LY19 and GA10), and Mouse embryonic fibroblasts (MEFs)

  • Concentraties

    ~10 μM

  • Incubatietijd

    11-15 days

  • Methode

    Exponentially growing diffused large B-cell lymphoma (DLBCL) cells are seeded in 12-well plates at a density of 1 × 105 cells/mL with the indicated concentration of EI1. Viable cell number is determined every 3–4 d for up to 14 or 15 d by Vi-CELL. Mouse embryonic fibroblasts (MEFs) are seeded in a six-well plate at 2.5 × 104 cell/mL and treated with this compound (3.3 μM) or 4-OH-tamoxifen (100 nM). Viable cell number is determined at days 3, 6 and 11. On days of cell counts, fresh growth medium and this chemical are replenished and cells split back to a density of 1 × 105 cells/mL. Total cell number is expressed as split-adjusted viable cells per milliliter. IC50 is calculated by PRISM and all proliferation experiments are repeated more than two times and representative data are presented.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23236167/

Klantproductvalidatie

<p>EZH2 inhibitors EI1 or GSK343 are applied in MDA-MB-231 breast cancer cells with NBAT1 over-expression. The invasion suppression effects of NBAT1 was reversed by concomitant EZH2 inhibitors.</p>

, , Oncotarget, 2015, 6(32):32410-25.

<p>qRT-PCR analysis for LIMK2b in H446DDP, H69AR cells inhibited EZH2 with EI1 or GSK343 or transfected with siRNA targeting EZH2 (si-NC, si-EZH2 1* and si-EZH2 2*)</p>

, , Mol Cancer, 2017, 16(1):5

NBAT1 inhibits invasion of breast cancer cells via EZH2. a. Binding of NBAT1 to EZH2 complex in MDA-MB-231 cells, shown by RNA immunoprecipitation followed qRT-PCR (mean±SD, n=3, *** p < 0.001 versus lgG). b. Representative images of Boyden chamber assay for invaded cells. (Over-expression NBAT1 while inhibit EZH2 with EI1 or GSK343 in MDA-MB-231.) c. Histogram showing that the number of invaded cells with inhibited EZH2 was significantly higher than for DMSO, and similar to control groups (untreated, mock and vector, mean±SD, n=3, *** P < 0.001). d., e., qRT-PCR and western blot analysis for DKK1 in NBAT1-knockdown MCF7 cells inhibited EZH2 with EI1 or GSK343 or transfected with siRNA targeting EZH2 (NC, siEZH2-1 and siEZH2-2).

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2015, 6(32): 32410-32425. ]

Sellecks EI1 Is geciteerd door 6 Publicaties

Genetic and epigenetic characterization of sarcoma stem cells across subtypes identifies EZH2 as a therapeutic target [ NPJ Precis Oncol, 2025, 9(1):7] PubMed: 39789291
Epigenetic Reprogramming with Antisense Oligonucleotides Enhances the Effectiveness of Androgen Receptor Inhibition in Castration-Resistant Prostate Cancer [ Cancer Res, 2018, 78(20):5731-5740] PubMed: 30135193
Epigenetic drift of H3K27me3 in aging links glycolysis to healthy longevity in Drosophila [ Elife, 2018, 7e35368] PubMed: 29809154
Long non-coding RNA TUG1 is involved in cell growth and chemoresistance of small cell lung cancer by regulating LIMK2b via EZH2. [Niu Y, et al. Mol Cancer, 2017, 10.1186/s12943-016-0575-6] PubMed: 28069000
The Human Immunodeficiency Virus 1 ASP RNA promotes viral latency by recruiting the Polycomb Repressor Complex 2 and promoting nucleosome assembly. [ Virology, 2017, 506:34-44] PubMed: 28340355
NBAT1 suppresses breast cancer metastasis by regulating DKK1 via PRC2 [Hu P, et al. Oncotarget, 2015, 6(32):32410-25] PubMed: 26378045

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.