In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
3.9mg/ml
(9.94mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 78 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
0.55mg/ml
(1.40mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 11 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Decernotinib (VX-509) is een potente en selectieve JAK3-remmer met een Ki van 2,5 nM, wat een >4-voudige selectiviteit aantoont ten opzichte van respectievelijk JAK1, JAK2 en TYK2. Het bevindt zich momenteel in Fase 2/3.
Doelen
JAK3
JAK1
JAK1
JAK2
TYK2
2.5 nM(Ki)
11 nM
11 nM(Ki)
13 nM(Ki)
13 nM(Ki)
In vitro
In HT-2-cellen remt Decernotinib (VX-509) de IL-2-gestimuleerde HT-2 STAT-5-fosforylering, de proliferatie van menselijke T-celblasten en de CD40L/IL-4-geïnduceerde B-celproliferatie.
In Vivo
In een ratmodel van collageen-geïnduceerde artritis resulteert S7541 (50 mg/kg, p.o.) in een dosisafhankelijke vermindering van enkelzwelling en pootgewicht en verbeterde histopathologiescores van de poot. In een muismodel van oxazolon-geïnduceerde vertraagde overgevoeligheid onderdrukt S7541 (50 mg/kg, p.o.) significant oedeem in het oor. In een rat HvG-model resulteert S7541 (50 mg/kg, p.o.) in een dosisafhankelijke remming van popliteale lymfeklier (PLN) hyperplasie.
Het effect van Decernotinib (VX-509) op de JAK3-activiteit wordt beoordeeld door de residuele kinase-activiteit van het recombinant tot expressie gebrachte JAK3-kinasedomein te meten met behulp van een radiometrische test. De uiteindelijke concentraties van de componenten in de test zijn als volgt: 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol (DTT), 0,01% BSA, 0,25 nM JAK3, 0,25 mg/ml polyE4Y en 5 μM 33P-γ-ATP (200 µCi/µmol). Een stamoplossing van 10 mM van deze verbinding wordt bereid in DMSO, waaruit verdere verdunningen worden bereid. Een substraatmengsel (100 mM HEPES, 10 mM MgCl2, 0,5 mg/ml polyE4Y en 10 μM 33P-γ-ATP) wordt toegevoegd en ermee gemengd. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van een enzymmengsel [100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 0,02% BSA, 0,5 nM JAK3]. Na 15 minuten wordt de reactie gestopt met 20% trichloorazijnzuur (TCA). De gestopte reactie wordt overgebracht naar de GF/B-filterplaten en driemaal gewassen met 5% TCA. Na de toevoeging van Ultimate Gold scintillant (50 μl) worden de monsters geteld in een Packard TopCount gamma-teller (PerkinElmer). Bij deze procedure is de opgesloten radioactiviteit een maat voor de residuele JAK3 kinase-activiteit. Uit de activiteit versus concentratie van de VX-509-titratiecurve werd de Ki-waarde bepaald door de gegevens aan een vergelijking voor competitieve strakke bindingsremmingskinetiek te passen met behulp van Prism-software.
Frozen purified human B cells are thawed, washed, and resuspended in complete medium. Cells are plated onto a 96-well plate at a density of 2 × 105 cells/well. Decernotinib (VX-509) is added, and plates are incubated for 30 minutes at 37°C, followed by stimulation with a combination of 10 ng/ml IL-4 and 1 μg/ml CD40L. DMSO alone is added to the top two rows, one of which is stimulated with IL-4 or CD40L (negative control) and the other of which served as a proliferation control. The plates are incubated at 37°C for 6 days. On day 6, cells are pulsed with [3H]thymidine for 7 hours and harvested onto filters for radioactive determination using a PerkinElmer-Wallace beta counter (1205 Betaplate Beta Liquid Scintillation Counter). Data are analyzed with Softmax pro software to generate an IC50 value.
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
