CH5132799

Catalogusnr.S2699 Batch:S269901

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C15H19N7O3S
Molecuulgewicht 377.42 CAS-nr. 1007207-67-1
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO Insoluble
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving CH5132799 (MEN1611, PA799) remt klasse I PI3K's, met name PI3Kα met een IC50 van 14 nM; deze verbinding is minder krachtig voor PI3Kβδγ, terwijl gevoelig in PIK3CA-mutaties in cellijnen. Fase 1.
Doelen
PI3Kα PI3Kγ PI3Kβ PI3Kδ
14 nM 36 nM 0.12 μM 0.50 μM
In vitro CH5132799 remt selectief klasse I PI3K's, PI3Kα (IC50 = 0,014 μM), PI3Kβ (IC50 = 0,12 μM), PI3Kδ (IC50 = 0,50 μM), PI3Kγ (IC50 = 0,036 μM), maar toont minder remming van klasse II PI3K's, klasse III PI3k en mTOR en ook geen remmende activiteit (IC50 > 10 μM) tegen 26 proteïnekinasen. Deze verbinding vertoont meer remmende activiteiten tegen PI3Kα met oncogene mutaties E542K (IC50 = 6,7 nM), E545K (IC50 = 6,7 nM) en H1047R (IC50 = 5,6 nM) dan wild-type PI3Kα. Dit chemische product behandelde borstkanker KPL-4 cellen, die de PIK3CA-mutatie bevatten, fosforylering van Akt en zijn directe substraten, PRAS40 en FoxO1/3a en fosforylering van downstream factoren, waaronder S6K, S6 en 4E-BP1, worden effectief onderdrukt. Kankercellijnen met PIK3CA-mutaties zijn significant gevoelig voor deze verbinding In humane tumorcellijnen met PI3K-routeactivering door mutatie vertoont het een krachtige antiproliferatieve activiteit [HCT116(CRC): IC50 = 0,20 lM, KPL-4(BC):13 IC50 = 0,032 lM, T-47D(BC): IC50 = 0,056 lM, SK-OV-3(Ovarian): IC50 = 0,12 lM]. Het onderdrukt effectief de fosforylering van AKT in KPL-4 cellen.
In Vivo CH5132799 vertoont een krachtige in vivo antitumoractiviteit in verschillende xenograftmodellen met PIK3CA-mutaties. Deze verbinding overwint mTORC1-remming-gemedieerde Akt-activering en hergroei van xenografttumoren door langdurige everolimus-toediening. Het is een klinische kandidaat die een uitstekende orale biologische beschikbaarheid (BA) (101% bij muizen), stabiliteit in microsomen van de menselijke lever en in vivo antitumoractiviteit in het PC-3 xenograftmodel (TGI: 101% bij 25 mg/kg, po, eenmaal daags × 11 dagen) vertoont. Deze chemische stof vertoont een goede orale BA bij muizen, ratten, apen en honden (F: 54,2-101%). In een humaan borstkanker (KPL-4: PI3Ka H1047R) xenograftmodel bij muizen toont orale behandeling met deze verbinding (12,5 mg/kg, eenmaal daags) een sterke tumorregressie. De sterke regressie blijft behouden gedurende de 6 weken durende toediening, zelfs in het intermitterende doseringsschema (eenmaal daags, 2 weken aan/1 week uit; eenmaal daags, 5 dagen aan/2 dagen uit), wat suggereert dat een flexibel toedieningsschema toepasbaar kan zijn in de kliniek.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • PI3K Assay

    De E542K, E545K en H1047R mutanten van PI3Kα worden bereid met een overlappende extensie-polymeraseketenreactie. Glutathion S-transferase-getagde PI3Kα mutanten en His-getagde p85α worden samen tot expressie gebracht met het BAC-TO-BAC Baculovirus Expression System. De remmende activiteiten van deze verbinding op PI3Kα (p110α/p85α), PI3Kβ(p110β/p85α), PI3Kδ (p110δ/p85α), PI3Kγ (p110γ), PI3KC2α, PI3KC2β, Vps34 en PI3Kα mutanten worden bepaald met de Adapta Universal Kinase Assay Kit. Tijdopgeloste fluorescentie wordt gemeten met een EnVision HTS microplaatlezer. IC50-waarden worden berekend met XLfit.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    various cancer cell lines belonging to 4 types of cancer—breast, ovarian, prostate, and endometrial cancer—in which the PIK3CA mutation and PTEN deficiency are frequently found and in which RAS/RAF is rarely mutated

  • Concentraties

    0 - 10μM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    The cell lines are added to the wells of 96-well plates containing 0.076 to 10,000 nM CH5132799 and incubated at 37 °C. After 4 days of incubation, Cell Counting Kit-8 solution is added and, after incubation for several more hours, absorbance at 450 nm is measured with Microplate-Reader iMark. The antiproliferative activity is calculated by the formula (1- T/C) × 100 (%), in which T and C represent absorbance at 450 nm of the cells treated with this compound (T) and that of untreated control cells (C). The IC50 values are calculated by using Microsoft Excel 2007.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    A total of 4 × 106 to 1.2 × 107 cells are injected subcutaneously into the right flank of female BALB-nu/nu mice.

  • Doseringen

    0.39, 0.78, 1.56, 3.13, 6.25, 12.5 and 25 mg/kg

  • Toediening

    Orally administered once a day.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21558396/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21316229/

Klantproductvalidatie

Effect of selected compounds on MLC phosphorylation induced by 2-AG. Washed platelets (1.0 x 10<sup>9</sup> platelets/mL) were preincubated at 37 ℃ for 10 min with saline or 20 uM LY294002 (L), 10 uM CH5132799 (C), 10 uM TGX221 (T), 10 uM MK2206 (M), 20 uM Y27632 (Y), 1 uM PIK-75 (P), 1 U/mL apyrase (AP), 5 uM AS252424 (AS), 1 uM IC87114 (IC) and then stimulated for 30 s with 10 uM 2-AG. At the end of incubation suitable aliquots were immunoblotted with anti-p-MLC (thr18/ser19) as detailed in Methods. Blot is representative of four independent experiments.

Gegevens van [ Biochimie , 2014 , 105, 182-91 ]

<p>A549 cell was trypsinized and plated at 50% confluence in DMEM. 16 hours later, CH5132799 was added at final concentrations of 0, 1, 5, 10 and 20uM. Another 24 hours later, cells were harvested in RIPA with protease and phosphatase inhibitor cocktail. Total protein concentration was measured by BCA method. Lysates equivalent to 20ug total protein were subject to Western Blot, using total- AKT, pS473-AKT and beta-actin (internal control) antibodies.</p>

,

Sellecks CH5132799 Is geciteerd door 4 Publicaties

Examining PI3K-signaling-dependent regulation of lens organelle free zone formation via immunolocalization and immunoblotting in chick embryos [ STAR Protoc, 2023, 10.1016/j.xpro.2023.102569] PubMed: 37713308
Examining PI3K-signaling-dependent regulation of lens organelle free zone formation via immunolocalization and immunoblotting in chick embryos [ STAR Protoc, 2023, 4(4):102569] PubMed: 37713308
Effect of 2-arachidonoylglycerol on myosin light chain phosphorylation and platelet activation: The role of phosphatidylinositol 3 kinase/AKT pathway [Signorello MG et al. Biochimie, 2014, 105:182-91] PubMed: 25068972
A chemical biology approach identified PI3K as a potential therapeutic target for neurofibromatosis type 2. [Petrilli AM, et al. Am J Transl Res, 2014, 6(5):471-493] PubMed: 25360213

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.