In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Brilanestrant (GDC-0810, ARN-810) is een potente ER-α-binder (ER-α, IC50 = 6,1 nM; ER-β, IC50 = 8,8 nM). Deze verbinding is een volledige transcriptionele antagonist zonder agonisme en vertoont goede potentie en werkzaamheid bij de afbraak van ER-α (EC50 = 0,7 nM) en de levensvatbaarheid van MCF-7 borstkankercellen (IC50 = 2,5 nM) met goede selectiviteit ten opzichte van andere nucleaire hormoonreceptoren.
Doelen
ERα (Cell-free)
ERβ (Cell-free)
6.1 nM
8.8 nM
In vitro
In celvrije radioligand competitieve bindingstesten bindt Brilanestrant (GDC-0810) zowel ERα als ERβ met een lage nanomolaire affiniteit. Deze verbinding heeft weinig tot geen remming tegen CYP1A2, CYP2D6 of CYP3A4 (IC50 > 20 μM), een bescheiden remmend effect op CYP2C9 en CYP2C19 (IC50 = 2,2 en 3,3 μM respectievelijk), en een potente remming van CYP2C8 (IC50 van <0,1 μM). De selectiviteit ervan ten opzichte van andere nucleaire hormoonreceptoren blijkt ook goed te zijn. In transcriptionele reportertests voor de mineralocorticoïde (MR), progesteron-A (PR-A), progesteron (PR-B) en glucocorticoïde (GR) receptoren heeft het minimale activiteit (IC50 > 1 μM). Terwijl het in bindingstesten weinig activiteit vertoont ten opzichte van de androgeenreceptor (AR; IC50 > 4 μM) en GR (IC50 = 0,99 μM). GDC-0810-gemedieerde ERα-depletie is afhankelijk van het 26S-proteasoom. Het antagoniseert ERα-ligandbindende domeinmutanten in vitro en in vivo. In celvrije E2-competitieve bindingstesten die werden gebruikt om de binding van deze verbinding aan ER.WT, ER.Y537S en ER.D538G ligandbindende domeinen te bepalen, behoudt het zijn vermogen om E2 krachtig te verdringen uit het ligandbindende domein, zij het met een licht verhoogde IC50 (WT: 2,6 nM versus ER.Y537S: 5,5 nM en ER.D538G: 5,4 nM). Het kan het PGC1α co-activatorpeptide van het gemuteerde ligandbindende domein verdringen, wat impliceert dat het in staat is om een 'actieve' naar 'inactieve' conformationele verschuiving van mutant ER te bewerkstelligen, zij het met een ~vijf- tot zevenvoudige vermindering van biochemische potentie vergeleken met wild-type ER.
In Vivo
Brilanestrant (GDC-0810) vertoont een farmacokinetisch profiel dat wordt gekenmerkt door lage klaring over soorten heen en goede biologische beschikbaarheid (40-60%). Zoals te verwachten is voor een lipofiel carbonzuur, is de verbinding sterk gebonden aan plasmaproteïnen (>99,5% over soorten heen) en heeft het een laag tot matig verdelingsvolume (Vss = 0,2-2,0 L/kg over soorten heen). Het vertoont een goede biologische beschikbaarheid over soorten heen en toont robuuste activiteit in tamoxifen-gevoelige en tamoxifen-resistente xenograftmodellen van borstkanker. Deze verbinding vertoont ook milde oestrogene activiteit in baarmoedermodellen in vitro en in vivo.
MCF-7 cells are trypsinized and washed twice in phenol red free RPMI containing 5% charcoal dextran stripped FBS with 20 mM HEPES and NEAA and adjusted to a concentration of 200000 cells per mL with the same medium. Next, 16 μL of the cell suspension (3200 cells) is added to each well of a poly-D-lysine coated 384-well plate, and the cells are incubated at 37℃ over 4 days to allow the cells to adhere and grow. On day 4, a 10-point, serial 1:5 dilution of Brilanestrant (GDC-0810) is added to the cells in 16 μL at a final concentration ranging from 10−5 M to 5.12 × 10−12 M or 10−6 M to 5.12 × 10−13 M for fulvestrant. At 4 h post compound addition, the cells are fixed by adding 16 μL of 30% formalin to the 32 μL of cells and this compound (10% formalin final concentration) for 20 min. Cells are then washed twice with PBS Tween 0.1% and then permeabilized in PBS 0.1% Triton (50 μL/well) for additional 15 min. The PBS 0.1% triton is decanted, and the cells are washed: LI-COR blocking buffer (50 μL/well) was added, the plate is spun at 3000 rpm, and then the blocking buffer is decanted. Additional LI-COR blocking buffer (50 μL/well) is added, and the cells are incubated overnight at 4℃. The blocking buffer is decanted, and the cells are incubated overnight at 4℃ with SP1 anti-ER rabbit monoclonal antibody diluted 1:1000 in LI-COR blocking buffer/0.1% Tween-20. Wells, which are treated with blocking buffer with Tween but no antibody, are used as a background control. Wells are washed twice with PBS Tween 0.1% to remove free SP1 antibodies, and the cells are incubated at room temp for 60−90 min in LI-COR goat antirabbit IRDyeTM 800CW (1:1000) and DRAQ5 DNA dye diluted in LI-COR blocking buffer containing 0.1% Tween-20 and 0.01% SDS. Cells are then washed with 0.1%Tween-20/PBS three times. Plates are scanned on a LI-COR Odyssey infrared imaging system.
Sellecks Brilanestrant (GDC-0810) Is geciteerd door 2 Publicaties
G1T48, an oral selective estrogen receptor degrader, and the CDK4/6 inhibitor lerociclib inhibit tumor growth in animal models of endocrine-resistant breast cancer.
[ Breast Cancer Res Treat, 2020, 10.1007/s10549-020-05575-9]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
