BIO-acetoxime

Catalogusnr.S7915 Batch:S791501

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C₁₈H₁₂BrN₃O₃

Molecuulgewicht

398.21

CAS-nr.

667463-85-6

Oplosbaarheid (25°C)*

In vitro

DMSO

19 mg/mL (47.71 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving

BIO-acetoxime (GSK-3 Inhibitor X) is een potente duale GSK3 remmer met een IC50 van 10 nM, >240-voudige selectiviteit ten opzichte van CDK5/p25, CDK2/cyclin A en CDK1/cyclin B.

Doelen

GSK-3α	GSK-3β
10 nM	10 nM

In vitro

In menselijke orale epitheelcellen onderdrukt BIO-acetoxime de virale genexpressie en beschermt het orale epitheelcellen tegen HSV-1-infectie. In SY5Y-MYCN-cellen vermindert deze verbinding sterk de c-MYC-expressie en de p-SMAD3-niveaus. Het vermindert ook de cellevensvatbaarheid van KCN-, KCNR-, SY5Y-, Kelly- en IMR32-cellen door apoptose te mediëren. In HEK 293T-cellen blijkt deze chemische stof ook de antivirale aangeboren immuniteit stroomafwaarts van IRF3-activatie te verminderen door remming van GSK3-activiteiten.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:^{^[1]}	Kinase Assays Kinase-activiteiten worden geanalyseerd in Buffer A of C, bij 30 °C, bij een finale ATP-concentratie van 15 M. Blanco waarden worden afgetrokken en activiteiten berekend als pmol fosfaat geïncorporeerd voor een incubatie van 10 min. De activiteiten worden uitgedrukt in % van de maximale activiteit, d.w.z. in afwezigheid van remmers. Controles worden uitgevoerd met geschikte verdunningen van DMSO. GSK-3 wordt gezuiverd uit varkenshersenen door affiniteitschromatografie op geïmmobiliseerd axine. Het wordt geanalyseerd, na een 1/100 verdunning in 1 mg BSA/mL 10 mM DTT, met 5 L 40 M GS-1 peptide als substraat, in buffer A, in aanwezigheid van 15 M [-P] ATP (3000 Ci/mmol; 1 mCi/mL) in een finaal volume van 30 L. Na 30 min incubatie bij 30 °C, worden 25 L aliquots van het supernatant gespot op 2,5 3 cm stukjes Whatman P81 fosfocellulosepapier, en, 20 s later, worden de filters vijf keer gewassen (gedurende ten minste 5 min per keer) in een oplossing van 10 mL fosforzuur/liter water. De natte filters worden geteld in aanwezigheid van 1 mL ACS scintillatievloeistof. CDK1/cyclin B wordt geëxtraheerd in homogenisatiebuffer uit M-fase zeester (Marthasterias glacialis) occten en gezuiverd door affiniteitschromatografie op p9CKShs1-sepharose kralen, waaruit het wordt geëlueerd door vrij p9CKShs1. De kinase-activiteit wordt geanalyseerd in buffer C, met 1 mg histone H1 /mL, in aanwezigheid van 15 M [-P] ATP (3000 Ci/mmol; 1 mCi/mL) in een finaal volume van 30 L. Na 10 min incubatie bij 30 °C, worden 25 L aliquots van het supernatant gespot op P81 fosfocellulosepapieren en behandeld zoals hierboven beschreven. CDK5/p25 wordt gereconstitueerd door gelijke hoeveelheden recombinante zoogdier CDK5 en p25, tot expressie gebracht in E. coli als GST (Glutathione-S-transferase) fusie-eiwitten, te mengen en gezuiverd door affiniteitschromatografie op glutathion-agarose (p25 is een getrunceerde versie van p35, de 35 kDa CDK5-activator). De activiteit wordt geanalyseerd in buffer C zoals beschreven voor CDK1/cyclin B.0
Celassay:^{^[3]}	Cellijnen KCN, KCNR, SY5Y, Kelly, and IMR32 cells Concentraties ~1 μM Incubatietijd 72 h Methode Cell viability is analyzed by CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay according to manufacturer's instructions, approximately 5,000 cells are plated per well of 96-well tissue culture plates with 100 μL of medium. To assess cell viability, rather than proliferation rate, inhibitor- and control-treated cells are assayed after the same growth time had elapsed. The results represent the mean ± SD of triplicate samples, expressed as a percentage of control.

Kinase-assay:^{^[1]}

Kinase Assays
Kinase-activiteiten worden geanalyseerd in Buffer A of C, bij 30 °C, bij een finale ATP-concentratie van 15 M. Blanco waarden worden afgetrokken en activiteiten berekend als pmol fosfaat geïncorporeerd voor een incubatie van 10 min. De activiteiten worden uitgedrukt in % van de maximale activiteit, d.w.z. in afwezigheid van remmers. Controles worden uitgevoerd met geschikte verdunningen van DMSO. GSK-3 wordt gezuiverd uit varkenshersenen door affiniteitschromatografie op geïmmobiliseerd axine. Het wordt geanalyseerd, na een 1/100 verdunning in 1 mg BSA/mL 10 mM DTT, met 5 L 40 M GS-1 peptide als substraat, in buffer A, in aanwezigheid van 15 M [-P] ATP (3000 Ci/mmol; 1 mCi/mL) in een finaal volume van 30 L. Na 30 min incubatie bij 30 °C, worden 25 L aliquots van het supernatant gespot op 2,5 3 cm stukjes Whatman P81 fosfocellulosepapier, en, 20 s later, worden de filters vijf keer gewassen (gedurende ten minste 5 min per keer) in een oplossing van 10 mL fosforzuur/liter water. De natte filters worden geteld in aanwezigheid van 1 mL ACS scintillatievloeistof. CDK1/cyclin B wordt geëxtraheerd in homogenisatiebuffer uit M-fase zeester (Marthasterias glacialis) occten en gezuiverd door affiniteitschromatografie op p9CKShs1-sepharose kralen, waaruit het wordt geëlueerd door vrij p9CKShs1. De kinase-activiteit wordt geanalyseerd in buffer C, met 1 mg histone H1 /mL, in aanwezigheid van 15 M [-P] ATP (3000 Ci/mmol; 1 mCi/mL) in een finaal volume van 30 L. Na 10 min incubatie bij 30 °C, worden 25 L aliquots van het supernatant gespot op P81 fosfocellulosepapieren en behandeld zoals hierboven beschreven. CDK5/p25 wordt gereconstitueerd door gelijke hoeveelheden recombinante zoogdier CDK5 en p25, tot expressie gebracht in E. coli als GST (Glutathione-S-transferase) fusie-eiwitten, te mengen en gezuiverd door affiniteitschromatografie op glutathion-agarose (p25 is een getrunceerde versie van p35, de 35 kDa CDK5-activator). De activiteit wordt geanalyseerd in buffer C zoals beschreven voor CDK1/cyclin B.0

Celassay:^{^[3]}

Cellijnen
KCN, KCNR, SY5Y, Kelly, and IMR32 cells
Concentraties
~1 μM
Incubatietijd
72 h
Methode
Cell viability is analyzed by CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay according to manufacturer's instructions, approximately 5,000 cells are plated per well of 96-well tissue culture plates with 100 μL of medium. To assess cell viability, rather than proliferation rate, inhibitor- and control-treated cells are assayed after the same growth time had elapsed. The results represent the mean ± SD of triplicate samples, expressed as a percentage of control.

Referenties

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14761195/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23392633/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24282277/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26100021/

Uitklappen

Klantproductvalidatie

: Gegevens van [ , , Journal of Functional Foods, 2017, 31:217-228 ]

Sellecks BIO-acetoxime Is geciteerd door 5 Publicaties

Deferasirox Causes Leukaemia Cell Death through Nrf2-Induced Ferroptosis [ Antioxidants (Basel), 2024, 13(4)424]	PubMed: 38671872
Synthetic Lethality of Combined Bcl-2 Inhibition and p53 Activation in AML: Mechanisms and Superior Antileukemic Efficacy. [ Cancer Cell, 2017, 32(6):748-760]	PubMed: 29232553
Carnosic acid alleviates hyperlipidemia and insulin resistance by promoting the degradation of SREBPs via the 26S proteasome [ZhishenXie, et al. J Funct Foods, 2017, 10.1016/j.jff.2017.01.040]
Carnosic acid alleviates hyperlipidemia and insulin resistance by promoting the degradation of SREBPs via the 26S proteasome [ Journal of Functional Foods, 2017, 31:217-228]	PubMed: None
Overexpression of Suprabasin is Associated with Proliferation and Tumorigenicity of Esophageal Squamous Cell Carcinoma [ Sci Rep, 2016, 6:21549]	PubMed: 26899563

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.