In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
Apoptosis Activator 2 induceert sterk caspase-3 activering, PARP splitsing en DNA fragmentatie, wat leidt tot celdestructie (Apaf-1 afhankelijk) met IC50 van ~4 μM, inactief voor HMEC, PREC of MCF-10A cellen.
Doelen
Caspase-3
In vitro
Apoptosis Activator 2 (20 μM) bij de verlaagde cyto c concentratie verhoogt de fractie Apaf-1 in het apoptosoom met 1,5-voudig tot 33%. Deze verbinding verhoogt de mate van caspase-3 activering bij het verlaagde niveau van cyto c en caspase-3 activering met 4-voudig. Het induceert sterk caspase-3 activering, PARP splitsing en DNA fragmentatie, en doodt uiteindelijk cellen met een IC50 van 4 μM. Deze activator induceert Apoptosis van PBL, HUVEC, Jurkat, Molt-4, CCRF-CEM, BT-549, MDA-MB-468 en NCI-H23 met een IC50 van 50 μM, 43 μM, 4 μM, 6 μM, 9 μM, 20 μM, 44 μM en 35 μM. Het oefent een cytostatisch effect uit op de meerderheid van de geteste tumorcellijnen, waarbij de celgroei met 50-100% wordt geremd bij 10 μM in 40 van de 48 geteste cellijnen. Deze chemische stof induceert celdood door het opwekken van apoptosoomvorming. Het niveau van En1-expressie heeft geen significante invloed op de overlevingspercentages van ventrale middenhersenkweken voor deze verbinding (-8,1 ± 6,0%). De overlevingskans wordt niet significant gewijzigd als de andere drie reagentia worden gebruikt (-10,7 ± 4,7%) voor deze activator. Deze verbinding (10 μM) induceert Apoptosis in AGS-cellen, zoals geëvalueerd door apoptotische DNA-ladder en Tunel-assay. Het (10 μM) verhoogt de inductie van Apoptosis door anti TROP2 geconjugeerde liposomen. Cyclohexamide (10 μg/mL) of zVAD (50 μM) beschermt significant tegen deze chemische toxiciteit in neuronale kweken. Deze activator (3 μM) resulteert in talrijke neuronen met pyknotische kernen die wijzen op celdood waarbij Apoptosis betrokken is. DHT (10 nM) of E2 (10 nM) beschermt significant tegen de toxiciteit van deze verbinding in neuronale kweken.
Cytoplasmatische extracten van HeLa-cellen worden bereid volgens eerder gepubliceerde rapporten. Apoptosis Activator 2 in DMSO wordt verdeeld over 96-well microtiterplaten met een eindconcentratie van 1 mM (uiteindelijke DMSO-concentratie is 1% vol/vol). Aan elk putje wordt 250 μg totaal eiwit uit cytoplasmatische extracten in HEB-buffer (50 mM Hepes, pH 7,4/50 mM KCl/5 mM EGTA/2 mM MgCl), met 2 mM DTT, 2 μM cyto c en 0,5 μM DEVD-AFC (Asp-Glu-Val-Asp-7-amino-4-trifluoromethylcoumarin) substraat in een totaal van 150 μL toegevoegd. Platen worden geïncubeerd bij 37 ℃, en fluorescentie wordt elke 10 minuten afgelezen in een LJL Biosystems plaatlezer.
All viable cells within the defined field of a microscope reticle grid are counted using a manual mechanical counter by an experimenter blinded to condition. Cells are scored viable on the basis of both positive staining with the vital dye calcein acetoxymethyl ester and the morphological criterion of a smooth, spherical soma. Counts of viable cells are made in four non-overlapping fields per culture well with each condition represented by 3 separate wells. The number of viable cells counts per well for vehicle-treated control conditions ranged from 100-200. All experiments are repeated in at least 3 independent culture preparations. Raw cell count data are statistically analyzed with one-way ANOVA, followed by between group comparisons using the Fisher LSD test (significance indicated by P < 0.05). Cell viability is presented graphically as a percentage of live cells in the vehicle-treated control condition.
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12808146/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19291307/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23181231/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20561156/
Sellecks Apoptosis Activator 2 Is geciteerd door 5 Publicaties
ARNTL2 upregulation of ACOT7 promotes NSCLC cell proliferation through inhibition of apoptosis and ferroptosis
[ BMC Mol Cell Biol, 2023, 24(1):14]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
