Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222)

Ansamitocine p-3 (Maytansinol-isobutyraat, NSC292222) bij 5 μM remt de polymerisatie van tubuline, geïsoleerd uit runderehersenen, volledig, maar in tegenstelling tot VCR leidt deze verbinding bij een hoge concentratie van 80 μM niet tot de aggregatie van tubuline. Het depolymeriseert bij 16 μM ook krachtig het gepolymeriseerde tubuline (IC50 = 3,8 μM). De toevoeging van Ansamitocine p-3 aan kweekcellen blokkeert de morfologische verandering van AC-cellen van fibroepitheel naar een gliale celtype, veroorzaakt door blootstelling aan een bepaalde concentratie dibutyryl cyclisch adenosine 3':5'-monofosfaat. Bovendien veroorzaakt het bij 16 nM de snelle verspreiding van het goed gedefinieerde netwerk van cytoplasmatische microtubuli van A31-cellen. Kortdurende behandeling met deze verbinding remt ook de synthese van DNA in A31-cellen of KB-cellen. Deze resultaten bevestigen dat het werkt door interferentie met het microtubuli-assemblagesysteem, wat resulteert in een remming van de vorming van de mitotische spoelfiguur en, uiteindelijk, cytokilling. [1] Deze verbinding vertoont krachtige cytotoxiciteit tegen A-549, HT-29 en MCF-7 cellen op een dosisafhankelijke manier met ED50 van 4 ×10^-7, 4 × 10^-7 en 2 × 10^-6 μg/mL, respectievelijk. [2] Het vertoont ook cytotoxiciteit tegen HCT-116 cellen met een veel lagere EC50 van 0,081 nM. [3] Ansamitocine p-3 verhoogt het effect van straling in zowel Drosophila-cellen als menselijke kankercellen op een p53-afhankelijke manier. [4]

Behandeling met Ansamitocin p-3 (Maytansinol-isobutyraat, NSC292222) (>1 μg) onderdrukt significant de groei van leukemie SN36 en induceert een verhoogde arrestatie in metafase van P388-leukemiecellen. Bij 25 μg/kg/dag verlengt het de overlevingstijd van muizen met i.p. B16-melanoom met 130% significant. Deze verbinding verlengt ook significant de overlevingstijd van muizen met Ehrlich-ascitescarcinoom, Sarcoom 180 en P815-mastocytoom, terwijl het de overlevingstijd van muizen met ascites MOPC-104E-myeloom, leukemie L1210 en leukemie C1498 enigszins verlengt. [1]

• Polymerisatieremmingstest

  Na de toevoeging van 100 μL van verschillende concentraties Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyraat, NSC292222) oplossing (GTP minus MES buffer) of 1 M Tris buffer, pH 8.4 (voor blanco), aan 400 μL van rundertubuline oplossing (1 mg/mL in koude MES buffer), gedurende 10 tot 15 minuten bij 0 °C gehouden, wordt het mengsel verwarmd in een waterbad op 37 °C gedurende 30 tot 60 minuten. De polymerisatie van tubuline wordt gevolgd door een toename in turbiditeit van het mengsel tijdens het verwarmen. De turbiditeitsmeting wordt uitgevoerd bij 460 nm met een Hitachi type 101 spectrofotometer.

• Cellijnen

  A31 and KB

• Concentraties

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Incubatietijd

  ~24 hours

• Methode

  Cells are synchronized and then exposed to various concentrations of Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) for ~24 hours. After pulse-labeling at 37 °C for 1 hour with [³H]thymidine (5 Ci/mM, 1 µCi/mL) in 1 mL of the medium, the cells on coverslips are fixed with methanol:acetic acid (3:1). The acid-soluble fraction is washed out from the cells, and the radio activity of each coverslip is determined by a liquid scintillation counter.

• Dierlijke modellen

  Female DBA/2 mice bearing P388, L1210, or P815 cells, C57BL/6 mice bearing B16, or C1498 cells, ICR mice bearing sarcoma 180 and EAC, and BALB/c mice bearing MOPC-104E cells

• Doseringen

  ~200 μg/kg

• Toediening

  Administered i.p. or i.v. daily