Alisertib (MLN8237)

Catalogusnr.S1133 Batch:S113311

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H20ClFN4O4
Molecuulgewicht 518.92 CAS-nr. 1028486-01-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 35 mg/mL (67.44 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Alisertib (MLN8237) is een selectieve Aurora A-remmer met een IC50 van 1,2 nM in een celvrije test, en het heeft een >200-voudig hogere selectiviteit voor Aurora A dan Aurora B. Deze verbinding induceert celcyclusarrest, apoptose en autophagy. Fase 3.
Doelen
Aurora A
(Cell-free assay)
1.2 nM
In vitro

Alisertib (MLN8237) vertoont een >200-voudig hogere selectiviteit voor Aurora A dan de structureel verwante Aurora B met een IC50 van 396,5 nM, en heeft geen significante activiteit tegen 205 andere kinasen. Behandeling met deze verbinding (0,5 µM) remt de fosforylering van Aurora A in MM1.S- en OPM1-cellen, zonder de Aurora B-gemedieerde histon H3-fosforylering te beïnvloeden. Het remt significant de celproliferatie in multipel myeloom (MM) cellijnen met IC50-waarden van 0,003-1,71 µM, en vertoont een potentere anti-proliferatieactiviteit tegen primaire MM-cellen en MM-cellijnen in aanwezigheid van BM-stromacellen, evenals IL-6 en IGF-1, dan tegen MM-cellen alleen. Bij 0,5 µM induceert het een 2- tot 6-voudige toename in de G2/M-fase in primaire MM-cellen en cellijnen, evenals significante apoptosis en veroudering, waarbij de opregulatie van p53, p21 en p27, evenals PARP, caspase 3 en caspase 9-splitsing betrokken zijn. Bovendien vertoont het een sterk synergetisch anti-MM-effect met Hexadecadrol, evenals een additief effect met doxorubicine en LDP-341. Deze verbinding (0,5 µM) behandeling veroorzaakt de remming van de kolonieformatie van FLO-1, OE19 en OE33 slokdarmadenocarcinoom-cellijnen, en induceert een significante toename van het percentage polyploïde cellen, en vervolgens een toename van het percentage cellen in de sub-G1-fase, wat verder kan worden verbeterd in combinatie met NSC 119875 (2,5 µM), waarbij de hogere inductie van TAp73β, PUMA, NOXA, gekliefd caspase-3 en gekliefd PARP betrokken zijn in vergelijking met een behandeling met een enkel agens.

In Vivo

Alisertib (MLN8237) vermindert significant de tumorgrootte met een tumorremming (TGI) van 42% en 80% bij respectievelijk 15 mg/kg en 30 mg/kg, en verlengt de overleving van muizen in vergelijking met de controle.

Functies Eerste oraal beschikbare remmer van Aurora A.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Aurora A radioactieve Flashplate enzymtest

    Een Aurora A radioactieve Flashplate enzymtest wordt uitgevoerd om de aard en mate van remming te bepalen die wordt gemedieerd door Alisertib (MLN8237) in vitro. Recombinant Aurora A wordt tot expressie gebracht in Sf9-cellen en gezuiverd met GST-affiniteitschromatografie. Het peptidesubstraat voor Aurora A is geconjugeerd met biotine (Biotin-GLRRASLG). Aurora A kinase (5 nM) wordt getest in 50 mM Hepes (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 5 mM DTT, 0,05% Tween 20, 2 μM peptidesubstraat, 3,3 μCi/mL [γ-33P]ATP bij 2 μM, en toenemende concentraties van deze verbinding met behulp van Image FlashPlates.
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    MM1.S, MM.1R, LR5, RPMI 8226, DOX40, OPM1, OPM2, INA6, and U266

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

  • Incubatietijd

    24, 48, and 72 hours

  • Methode

    Cells are exposed to various concentrations of Alisertib (MLN8237) for 24, 48, and 72 hours. Cell viability is measured using MTT assay, and cell proliferation is measured using 3[H]-thymidine incorporation. For cell cycle analysis, cells are permeabilized by 70% ethanol at -20 °C, and incubated with 50 μg/mL PI and 20 units/mL RNase-A. DNA content is analyzed by flow cytometry using BDFACS-Canto II and FlowJo software. For the detection of apoptosis and senescence, cells are stained with Resorcinolphthalein isothiocyanate-annexin V and PI. Apoptotic cells are determined by flow cytometric analysis using BDFACS-Canto II and FlowJo software.
Dierstudie:

[2]
  • Dierlijke modellen

    Severe combined immune-deficient (SCID) mice inoculated subcutaneously with MM1.S cells

  • Doseringen

    ~30 mg/kg/day

  • Toediening

    Orally

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22016509/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20382844/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22302096/

Klantproductvalidatie

<p>Alisertib inhibits AURKA and AURKB in a concentration-dependent manner. (a) Alisertib induces G 2 /M delay or genome reduplication. HeLa cells were exposed to buffer or the indicated concentrations of Alisertib. After 24 h, the cells were harvested and analyzed with flow cytometry. The positions of 2N, 4N and 8N DNA contents are indicated. (b) Alisertib delays mitotic exit or induces slippage. HeLa cells stably expressing histone H2B-GFP were exposed to buffer or the indicated concentrations of Alisertib. Individual cells were then tracked for 24 h with time-lapse microscopy. Each horizontal bar represents one cell (n ¼ 50). Key: light gray ¼ interphase; black ¼ mitosis (from DNA condensation to anaphase or mitotic slippage); dark gray ¼ interphase after mitotic slippage; truncated bars ¼ cell death. (c) Different concentrations of Alisertib are involved in delaying mitotic exit and inducing slippage. Live-cell imaging of cells treated with Alisertib was described in panel (b). The duration of mitosis (mean±90% confidence interval) and the percentage of cells that underwent mitotic slippage during the imaging period was quantified. (d) Alisertib promotes apoptosis in a concentration-dependent manner. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 48 h. The cells were then harvested and analyzed with flow cytometry. (e) Concentration-dependent cytotoxicity of Alisertib. HeLa cells were cultured in the presence of the indicated concentrations of Alisertib for 48 h. The number of live and dead cells was analyzed with trypan blue exclusion assay. (f) Concentration-dependent suppression of long-term survival by Alisertib. HeLa cells were seeded on 60-mm culture plates and grown in the presence of 250 n M or 1 m M of Alisertib. After 24 h, the cells were washed gently and propagated in normal medium for another 10–12 days. Colonies were fixed and stained with crystal violet solution (examples of the plates are shown). Average±s.d. from three independent experiments. (g) Both AURKA and AURKB are inhibited by Alisertib.Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 2 h. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232were detected with immunoblotting. The asterisk indicates the position of an AURKB-like protein (the same throughout this study). Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. In this assay, nocodazole and MG132 (a proteasome inhibitor) were added to prevent the cells from exiting mitosis. Accordingly, the total AURKA and AURKB levels remained constant throughout the experiment. (h) Alisertib prevents activation of AURKA and AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap cells that entered mitosis. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer.</p>

Gegevens van [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Tissue levels of 53BP1, a-tubulin, IkB-a and IL-6 in an Hs294T xenograft treated with MLN8237 or vehicle control were visualized by immunofluorescence co-staining with DAPI. Representative micrographs are shown from triplicate experiments.

Gegevens van [ EMBO Mol Med , 2013 , 5(1), 149-66 ]

Inhibition of Aurka kinase activity by MLN8237 impairs expression of pluripotency genes in CCE cells as measured by qRT-PCR. All values shown are mean ?SEM for n=3. The level of phosphorylated H3(S10) (p-H3(S10)), an Aurka phosphorylation target site, is decreased in MLN8237-treated samples.

Gegevens van [ Cell Stem Cell , 2012 , 11, 179-94 ]

<p>Recruitment of clathrin to the mitotic spindle is controlled by phosphorylation of TACC3 by Aurora-A kinase. Representative micrographs of HEK293 cells incubated with 0.3 μM MLN8237 for 40 min. Cells were fixed and stained as indicated.</p>

Gegevens van [ EMBO J , 2012 , 30, 906-19 ]

Sellecks Alisertib (MLN8237) Is geciteerd door 380 Publicaties

Centromere protection requires strict mitotic inactivation of the Bloom syndrome helicase complex [ Nat Commun, 2025, 16(1):7832] PubMed: 40846865
Aurora A regulates the material property of spindle poles to orchestrate nuclear organization at mitotic exit [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00564-4] PubMed: 40940421
Targeted inhibition of Aurora kinase A promotes immune checkpoint inhibition efficacy in human papillomavirus-driven cancers [ J Immunother Cancer, 2025, 13(1)e009316] PubMed: 39773561
An Aurora kinase A-BOD1L1-PP2A B56 axis promotes chromosome segregation fidelity [ Cell Rep, 2025, 44(2):115317] PubMed: 39970043
The AURKA inhibitor alters the immune microenvironment and enhances targeting B7-H3 immunotherapy in glioblastoma [ JCI Insight, 2025, e173700] PubMed: 39928563
CDK1-mediated phosphorylation of LDHA fuels mitosis through LDHB-dependent lactate oxidation [ EMBO Rep, 2025, 10.1038/s44319-025-00573-8] PubMed: 40940446
Cellular senescence as a prognostic marker for predicting breast cancer progression in 2D and 3D organoid models [ Biomed Pharmacother, 2025, 189:118324] PubMed: 40616881
Actionable heterogeneity of hepatocellular carcinoma therapy-induced senescence [ Cancer Immunol Immunother, 2025, 74(7):207] PubMed: 40374812
Aurora B maintains spherical shape of mitotic cells via simultaneously stabilizing myosin II and vimentin [ J Mol Cell Biol, 2025, mjaf023] PubMed: 40795355
O 6-methylguanine DNA methyltransferase (MGMT) expression in U1242 glioblastoma cells enhances in vitro clonogenicity, tumor implantation in vivo, and sensitivity to alisertib-carboplatin combination treatment [ Front Cell Neurosci, 2025, 19:1552015] PubMed: 40336841

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.