Afatinib (BIBW2992)

Catalogusnr.S1011 Batch:S101112

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C24H25ClFN5O3
Molecuulgewicht 485.94 CAS-nr. 850140-72-6
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 97 mg/mL (199.61 mM)
Ethanol 97 mg/mL (199.61 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Afatinib remt EGFR/ErbB onomkeerbaar in vitro met een IC50 van respectievelijk 0,5, 0,4, 10, 14, 1 nM voor EGFRwt, EGFR L858R , EGFR L858R/T790M ErbB2 (HER2) en ErbB4 (HER4). Deze verbinding induceert autophagy.
Doelen
EGFR (L858R)
(Cell-free assay)		 EGFR (wt)
(Cell-free assay)		 ErbB4
(Cell-free assay)		 EGFR (L858R/T790M)
(Cell-free assay)		 HER2
(Cell-free assay)
0.4 nM 0.5 nM 1 nM 10 nM 14 nM
In vitro BIBW2992 vertoont een krachtige activiteit tegen zowel wild-type als mutante vormen van EGFR en HER2. Het is vergelijkbaar met Gefitinib in potentie tegen L858R EGFR, maar ongeveer 100 keer actiever tegen de Gefitinib-resistente L858R-T790M EGFR dubbele mutant. Deze verbinding vertoont krachtige effecten op zowel EGFR- als HER2-fosforylering in vivo. Het vergelijkt gunstig met referentieverbindingen (zoals Lapatinib et al.) in alle geteste celtypen, zoals de humane epidermoïde carcinoomcellijn A431 die wt EGFR tot expressie brengt, murine NIH-3T3-cellen getransfecteerd met wt HER2, evenals borstkankercellijn BT-474 en maagkankercellijn NCI-N87, die endogeen HER2 tot expressie brengen.
In Vivo Dagelijkse orale toediening van BIBW2992 in een dosis van 20 mg/kg gedurende 25 dagen resulteert in een dramatische tumorregressie met een cumulatieve behandelde/controle tumorvolume verhouding (T/C ratio) van 2%. Verminderde fosforylering van EGFR en AKT wordt bevestigd door immunohistochemische kleuring van weefselsecties. Daarom is deze verbinding, net als lapatinib en neratinib, een volgende generatie Protein Tyrosine Kinase (TKI) die humane epidermale groeifactorreceptor 2 (Her2) en epidermale groeifactorreceptor (EGFR) kinasen onomkeerbaar remt. Het is niet alleen actief tegen EGFR-mutaties die worden gericht door eerstegeneratie TKI's zoals Erlotinib of Gefitinib, maar ook tegen die welke ongevoelig zijn voor deze standaardtherapieën.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • In vitro kinase-activiteitstesten

    Het wildtype tyrosine kinase domein van het humane EGFR evenals dat van de EGFR L858R/T790M dubbele mutant worden gefuseerd met Glutathione-S-transferase (GST) en geëxtraheerd. De enzymactiviteit wordt vervolgens getest in aanwezigheid van de inhibitor BIBW2992, serieel verdund in 50% DMSO. Een willekeurig polymeer pEY (4:1) wordt gebruikt als substraat en gebiotinyleerd pEY (bio-pEY) wordt toegevoegd als tracingsubstraat. Het kinase domein van HER2 wordt gekloond met behulp van het baculovirus systeem en geëxtraheerd op dezelfde manier als dat van EGFR kinase. Details van assays voor EGFR, HER2, SRC, BIRK en VEGFR2 kinase activiteit zijn beschikbaar in de aanvullende informatie.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    NSCLC cells

  • Concentraties

    0-10 μM

  • Incubatietijd

    1 hour

  • Methode

    1 × 104 NSCLC cells are transferred into each well of a 96-well plate and cultured overnight in serum-free media for the EGFR phosphorylation assay. After addition of this compound on the next day, the plates are incubated at 37 °C for 1 hour. EGF-stimulation is done using 100 ng/mL for 10 min at room temperature. Cells are washed with ice cold PBS, extracted with 120 μL HEPEX buffer per well and shaken at room temperature for 1 hour. In all 2 × 104 cells per well is used for the HER2 phosphorylation assay. Streptavidin precoated plates are coated with anti-EGFR-biotin at 1:100 dilution in blocking buffer and c-erb2/HER2 oncoprotein Ab-5(Clone N24)-Biotin. Cell extracts is then transferred to the antibody-coated wells and incubated at room temperature for 1 hour. Extinction is measured at 450 nm.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Athymic NMRI-nu/nu female mice

  • Doseringen

    20 mg/kg

  • Toediening

    Oral administration

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18408761/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24266694/

Klantproductvalidatie

<p>Inhibition of signaling pathway activation in lung tumor cell lines by kinase inhibitors. Lung tumor cells were cultured in 10% FBS until reaching ∼80% confluence and then the cells were starved in serum-free medium for overnight, followed by 4-hour treatment with the inhibitors. Cell lysates were then prepared and used for determination of the pathway activation signals by the CEER assay.</p>

Gegevens van [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>Inhibition of anchorage-independent growth of lung tumor cell lines by selected inhibitors. Each selected cell line was treated with the indicated inhibitor at 0.1 μM and 1 μM concentrations for two weeks and cell colony size formation was scored under the Nikon inverted-phase microscope.</p>

Gegevens van [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h, Breast cancer cells incubated with the indicated concentrations of BIBW2992 for 3h,followed by 15-minute stimolation of 100ng/ml EGF</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Immunoblot analysis of serum starved H2030 cells pre-treated with 500 nM or 1 µM of gefitinib, crizotinib, CP-724714, or afatinib for 12 hr, followed by stimulation with EGF, HGF, NRG1, or their combination (50 ng/ml) for 10 min.

Gegevens van [ , , Nature, 2016, 534(7609):647-51 ]

Sellecks Afatinib (BIBW2992) Is geciteerd door 453 Publicaties

Lysosomal EGFR acts as a Rheb-GEF independent of its kinase activity to activate mTORC1 [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01110-x] PubMed: 40259053
Longitudinal single-cell multiomic atlas of high-risk neuroblastoma reveals chemotherapy-induced tumor microenvironment rewiring [ Nat Genet, 2025, 10.1038/s41588-025-02158-6] PubMed: 40229600
The potential of lazertinib and amivantamab combination therapy as a treatment strategy for uncommon EGFR-mutated NSCLC [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101929] PubMed: 39874964
AP1-mediated reprogramming of EGFR expression triggers resistance to BLU-667 and LOXO-292 in RET-rearranged tumors [ J Exp Clin Cancer Res, 2025, 44(1):154] PubMed: 40405293
Anti-galectin-9 therapy synergizes with EGFR inhibition to reprogram the tumor microenvironment and overcome immune evasion [ J Immunother Cancer, 2025, 13(7)e010926] PubMed: 40664443
Blocking cancer-fibroblast mutualism inhibits proliferation of endocrine therapy resistant breast cancer [ Mol Syst Biol, 2025, 10.1038/s44320-025-00104-6] PubMed: 40341770
PI3K-dependent GAB1/Erk phosphorylation renders head and neck squamous cell carcinoma sensitive to PI3Kα inhibitors [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):457] PubMed: 40533463
Exercise-induced adipokine Nrg4 alleviates MASLD by disrupting hepatic cGAS-STING signaling [ Cell Rep, 2025, 44(2):115251] PubMed: 39891907
Rare mutations at EGFR L747 position: molecular characteristics and superior response to afatinib in NSCLC patients [ ESMO Open, 2025, 10(9):105558] PubMed: 40834500
PTEN loss and ERBB2/ERBB3-mediated AKT reactivation drive resistance to MET inhibition in MET-amplified hepatocellular carcinoma [ Cell Oncol (Dordr), 2025, 10.1007/s13402-025-01097-y] PubMed: 40991144

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.