Tamoxifen Citrate

Tamoxifen Citrate vertoont een antitumor effect dankzij zijn anti-oestrogene activiteit (ER). De waarden voor de schijnbare affiniteit van deze verbinding voor de ER variëren tussen 30 en 0,01% van die verkregen voor estradiol, afhankelijk van de verschillende ER-bron (soort), eiwitconcentratie en conditie gebruikt voor de test. Binding van deze chemische stof aan ER leidt verder tot expressie-inhibitie van oestrogeen-gereguleerde genen, waaronder groeifactoren en angiogene factoren die door de tumor worden afgescheiden en die de groei kunnen stimuleren via autocriene of paracriene mechanismen. Het induceert ook direct geprogrammeerde celdood. [1] Deze verbinding produceert een remmend effect op de [³H]thymidine-incorporatie en DNA-polymerase-activiteit van MCF-7-cellen, evenals een vermindering van het DNA-gehalte van culturen en cel aantallen. Dit remmende effect van deze chemische stof op de groei van MCF-7-cellen kan gemakkelijk worden omgekeerd door toevoeging van estradiol aan het kweekmedium. 2 en 6 μM van dit middel verminderen het aantal cellen in de S-fase en verhogen het aantal cellen in G1. Bij 10 μM veroorzaakt het celdood binnen 48 uur. [2] Deze verbinding remt de groei van MCF-7 met een IC50 van ~10 nM na 10 dagen behandeling. Het remt de plasminogeenactivator-activiteit van MCF-7 en onderdrukt de estradiol-stimulatie van de plasminogeenactivator-activiteit. Deze chemische stof veroorzaakt ook minimale verhogingen van de cellulaire progesteronreceptor niveaus. [3] Het is in staat om de groei van prostaatkankercellen PC3, PC3-M en DU145 te remmen met een IC50 variërend van 5,5-10 μM, wat gerelateerd is aan de remming van proteïnekinase C en inductie van p21(waf1/cip1). [4]

Toediening van Tamoxifen Citrate aan snelgroeiende, estradiol-gestimuleerde MCF-7 xenografts resulteert in een dosisafhankelijke vertraging of stopzetting van de tumorgroei door een significante vermindering van de tumorcelproliferatie in de tumor. Deze verbinding leidt tot een vertraging van de tumorgroei (tumorverdubbelingstijd, 12 dagen), een significante toename van de potentiële tumorverdubbelingstijd (T_pot) (6,6 dagen) en een afname van de labelindex (%LI) (tot 8%) na 23 dagen behandeling, vergeleken met onbehandelde muizen die een volumeverdubbelingstijd van 5 dagen, een T_pot van 2,3 dagen en een %LI van 23% vertonen. [5] Het heeft niet alleen anti-oestrogene maar ook oestrogene eigenschappen, afhankelijk van de soort, het weefsel en het gen. Deze chemische stof heeft gunstige effecten op de bot- en serumlipidenconcentraties en stimuleert het endometrium. [1]

• Competitieve bindingsassays

  Cellen worden geoogst uit T-flessen van 150 cm² en cytosol wordt bereid met een eiwitconcentratie van ongeveer 2 mg/mL in fosfaatbuffer. Aliquoten van dit 180.000 ×g supernatant worden vervolgens geïncubeerd met verschillende concentraties van deze verbinding en 2,5 nM [³H]estradiol gedurende 16 uur bij 0-4 ℃. De vrije steroïden worden geabsorbeerd door dextran-houtskool [10 μL van 0,5% Dextran C-5% Norite A in TE-buffer] gedurende 1 uur bij 0 ℃, en aliquoten worden geteld na centrifugatie bij 800 ×g, 30 min. De relatieve bindingscapaciteit van elke competitor wordt genomen als de verhouding van de concentratie van radio-inert estradiol/competitor die nodig is om de helft van de specifieke [³H]estradiolbinding te remmen, waarbij de affiniteit van estradiol is ingesteld op 100%.

• Cellijnen

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentraties

  ~1 μM

• Incubatietijd

  10 days

• Methode

  MCF-7 cells are seeded into T-25 flasks (1.5×10⁵ cells/flask) and grown for 2 days in the MEM supplemented with 10 mM HEPES buffer, gentamicin (50 μg/mL), penicillin (100 units/mL), streptomycin (0.1 mg/mL), bovine insulin (6 ng/mL), hydrocortisone (3.75 ng/mL), and 5% calf serum that has been treated with dextran-coated charcoal for 45 min at 55 ℃ to remove endogenous hormones. The medium is then changed to MEM supplemented as described above, except that it contains 2% charcoal dextran-treated calf serum and various concentrations of this compound. At the end of incubation, cell numbers are counted.

• Dierlijke modellen

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7

• Doseringen

  2 cm Tamoxifen capsules

• Toediening

  Subcutaneous implantation