In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
2.15mg/ml
(10.08mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 43 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.
0.31mg/ml
(1.45mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 6.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar. * Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties. * Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)
Voorbereiden van stamoplossingen
Biologische activiteit
Beschrijving
PluriSIn #1 (NSC 14613) is een remmer van de stearoyl-coA desaturase 1 (SCD1) en is in staat om selectief hPSC's te elimineren.
Doelen
SCD1
In vitro
PluriSIn #1 (NSC 14613) heeft een robuust, snel en selectief cytotoxisch effect op hPSC's, met apoptose als het centrale celdoodmechanisme dat het activeert. Deze verbinding leidt tot ER-stress in hPSC's, wat een afname van ~30% in eiwitsynthese veroorzaakt bij 20 μM. Het veroorzaakt ook een afname van ~65% in stearoyl-coA desaturase (SCD1) activiteit en voorkomt teratoomvorming uit ongedifferentieerde hPSC's. PluriSIns remt ook mPSC's en belemmert de embryonale ontwikkeling van muizen.
Cellen worden gezaaid in 6-wells platen met een dichtheid van 50k tot 100k cellen per well. 24 uur later worden 20 μM PluriSIn #1 (NSC 14613) of 0,2% DMSO-controle toegevoegd aan de cellen. Na 12 uur incubatie bij 37 ℃, 5% CO2, wordt het oude medium verwijderd, de cellen gewassen met PBS, en nieuw medium met 2,3 μM van 0,75 UCi [1-14C] Stearinezuur toegevoegd. De cellen worden gedurende maximaal 4 uur geïncubeerd bij 37 ℃, 5% CO2. Na de incubatieperiode wordt het medium weggegooid en de cellen 3 keer gewassen met 2 mL PBS. 2 mL van het mengsel n-hexaan:isopropanol (3:2 v:v) wordt toegevoegd, en de cellen worden 30 min geïncubeerd bij 37 ℃, 5% CO2. Vervolgens wordt 2 mL Folch-oplossing (chloroform:methanol, 2:1, v:v) toegevoegd. De vloeistof wordt overgebracht naar buizen voor fase-scheiding door toevoeging van 1 mL water. De onderste organische fase wordt verdampt en gebruikt voor lipideverzeeping en TLC-scheiding van het vrije [1-14C] Stearinezuur (substraat) en [1-14C] Oliezuur (gevormd product). Lipiden geëxtraheerd uit de cellen worden aangebracht op TLC-platen die eerder waren ondergedompeld in 10% NO3 Ag en geactiveerd bij 120℃x60 min. Ongelabeld stearinezuur en oliezuur worden toegevoegd aan elk aanbrengpunt als dragers en als interne standaarden voor identificatie. De platen worden ontwikkeld met een oplosmiddelmengsel van Chloroform:MeOH:AcH:DDW (90:8:1:0,8). De vrije vetzuren worden gedetecteerd door U.V. na het besproeien van de TLC met een 2',7',dichlorofluoresceïne-oplossing. De vlekken die overeenkomen met stearinezuur en oliezuur worden afgeschraapt en de radioactiviteit geteld in een scintillatieteller. SCD1 desaturase-activiteit wordt berekend uit het percentage omzetting van substraat naar product en de omzetting naar pmol/min/106 cellen.
Relative cell numbers for PluriSIn #1 (NSC 14613) are determined by fixating the cells with 0.5% glutardialdehyde and staining with methylene blue dissolved in 0.1 M boric acid (pH 8.5). Color extraction is performed using 0.1 M hydrochloric acid, and the staining (which is proportional to cell number) is quantitated by measuring absorbance at 650 nM.
Referenties
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23318055/
Sellecks PluriSIn #1 (NSC 14613) Is geciteerd door 3 Publicaties
CTC-derived pancreatic cancer models serve as research tools and are suitable for precision medicine approaches
[ Cell Rep Med, 2024, 5(9):101692]
Targeting a Lipid Desaturation Enzyme, SCD1, Selectively Eliminates Colon Cancer Stem Cells through the Suppression of Wnt and NOTCH Signaling
[ Cells, 2021, 10(1)E106]
Clinical and biochemical relevance of monounsaturated fatty acid metabolism targeting strategy for cancer stem cell elimination in colon cancer.
[ Biochem Biophys Res Commun, 2019, 519(1):100-105]
RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.
VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.
NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.
