PIK-75 HCl

Catalogusnr.S1205 Batch:S120501

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C16H14BrN5O4S.HCl
Molecuulgewicht 488.74 CAS-nr. 372196-77-5
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 98 mg/mL (200.51 mM)
Ethanol 9 mg/mL (18.41 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving PIK-75 HCl is een p110α remmer met een IC50 van 5,8 nM (200 keer krachtiger dan p110β), isoformat-specifieke mutanten bij Ser773, en remt ook krachtig DNA-PK met een IC50 van 2 nM in celvrije assays.
Doelen
DNA-PK
(Cell-free assay)		 p110α
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)
2 nM 5.8 nM 76 nM 0.51 μM
In vitro PIK-75 toont de indrukwekkende potentie en isoformeselectiviteit bij p110α, terwijl de overeenkomstige IC50-waarden 1300 nM, 76 nM en 510 nM zijn voor andere PI3K-isoformen, respectievelijk p110β, -γ en -δ. Bovendien, bij binding aan gezuiverde p110α, is PIK-75 een non-competitieve remmer ten opzichte van ATP met een Ki van 36 nM en competitief ten opzichte van het substraat PI met een Ki van 2,3 nM. PIK-75 toont ook een krachtige remming van DNA-PK. PIK-75 (1 μM) vermindert de celoverleving door de mitochondriale activiteit significant te verlagen in ongestimuleerde niet-astmatische luchtweggladspiercellen (ASM), astmatische ASM-cellen en longfibroblasten. Terwijl in TGFβ-gestimuleerde ASM-cellen, PIK75 alleen de mitochondriale activiteit in astmatische cellen verlaagt zonder effecten in niet-astmatische cellen. Een recente studie toont aan dat PIK-75 (10 nM) de TNF-α-geïnduceerde CD38 mRNA-expressie remt en de TNF-α-geïnduceerde ADP-ribosyl cyclase-activiteit in menselijke luchtweggladspiercellen significant vermindert.
In Vivo In het ErbB3WT-tumormodel vermindert PIK-75 de in vitro chemotactische respons op HRGβ1 en verlaagt het de pAkt-niveaus met 40%. Bovendien vermindert PIK-75 de motiliteit van tumorcellen en de in vivo invasie in ErbB3WT primaire tumoren significant. Bij CD1-mannetjesmuizen leidt PIK-75 tot ernstige beperkingen in de insulinetolerantietest (ITT) en glucosetolerantietest (GTT), en een toename van de glucoseproductie tijdens een pyruvaattolerantietest (PTT).
Functies PI3K en DNA-PK remmer.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Remmingsassays

    De PI3K-remmer PIK-75 wordt opgelost in 10 mM dimethylsulfoxide en bewaard bij -20°C tot gebruik. PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl2, met 180 μM fosfatidylinositol, waarbij de reactie wordt gestart door toevoeging van 100 μM ATP (met 2,5 μCi [γ-32P]ATP). Na een incubatie van 30 minuten bij kamertemperatuur wordt de enzymreactie gestopt door toevoeging van 50 μL 1 M HCl. Fosfolipiden worden vervolgens geëxtraheerd met 100 μL chloroform/methanol [1:1 (v/v)] en 250 μL 2 M KCl, gevolgd door vloeibare scintillatietelling. Remmers worden verdund in 20% (v/v) dimethylsulfoxide om een concentratie versus remming van enzymactiviteitscurve te genereren, die vervolgens wordt geanalyseerd met behulp van Prism versie 5.00 voor Windows om de IC50 te berekenen. Voor kinetische analyse wordt een luminescentieassay gebruikt die het ATP-verbruik meet. PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl2 met PI en ATP in verschillende concentraties. Na een incubatie van 60 minuten bij kamertemperatuur wordt de reactie gestopt door toevoeging van 50 μL Kinase-Glo, gevolgd door nog eens 15 minuten incubatie. Luminescentie wordt vervolgens afgelezen met een Fluostar plaatlezer. Resultaten worden geanalyseerd met Prism.
Celassay:[3]
  • Cellijnen

    A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3 and HS852 cells

  • Concentraties

    0-10 μM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    Mitochondrial activity is assessed after stimulation with TGFβ with or without inhibitors for 48 hours using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay. Harvested washed cells are resuspended in DMEM-lO% FCS and aliquoted (500 μL) into 24-well cluster plates prior to serial dilution (1:2) in duplicates. To each well, 100 μL of an appropriate MTT concentration (dissolved in PBS and filtered through a 0.2 μm filter before use to remove any blue formazan product) is added immediately after diluting the cells, which are then incubated for 3.5 hours at 37 °C. The resulting blue formazan product is solubilized overnight (16 hours) at 37 °C by the addition of 500 μL of 10% sodium dodecyl sulfate　(SDS) in 0.01 M HCl to each well. A sample (150　μL)　from each duplicate well is transferred to a 96-well　microplate, and the optical density determinedby automated spectrophotometry against a reagent blank (no　cells).　Absorbance is measured at a test wavelength of 570 nm and a reference wavelength of 690 nm. For each primary cell culture, results from three to six wells from each treatment are averaged, and data are expressed as absorbance 570 to 690 nm.
Dierstudie:[5]
  • Dierlijke modellen

    MTLn3 cells are injected into the right fourth mammary fat pad from the head of female severe-combined immunodeficient/NCr mice.

  • Doseringen

    ≤1 μM

  • Toediening

    Administered via i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/
  • #
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Klantproductvalidatie

A549 cells were treated with DMSO or PIK-75 (200 nM) for 1 h and subsequently stimulated with izTRAIL for 24 h. Long-term survival was visualized after 7 days by crystal violet staining. One of two independent experiments is shown.

Gegevens van [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

A549 cells were treated with PIK-75 (100 nM) or SNS-032 (300 nM) for the indicated times. Cells were lysed and subjected to western blotting. One representative of two independent experiments is shown.

Gegevens van [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

DW compounds dose-dependently and persistently blocked the PI3K/mTOR signaling pathway in RH30 cells. DW09849 persistently inhibited PI3K signaling. RH30 cells treated with 0.1 uM DW09849 or PIK-75 were harvested at indicated times (0, 0.25, 0.75, 1.5, 3, 6, 12, and 24 hours). Western blot analyses were conducted to detect the indicated proteins. Data shown are representative of three independent experiments. Con, concentration.

Gegevens van [ J Pharmacol Exp Ther , 2014 , 348(3), 432-41 ]

<p>Knockdown of BRCA1 sensitizes cells to PI3K/AKT pathway inhibitors. MCF7 cells transfected with either BRCA1-siRNA or control-siRNA were treated with increasing amounts of inhibitors targeting the PI3K/AKT pathway for 48 h in triplicate. Viable cells were measured by MTT assay.</p>

Gegevens van [ Mol Carcinog , 2012 , 52, 667-75 ]

Sellecks PIK-75 HCl Is geciteerd door 46 Publicaties

Lysosomal PIP3 revealed by genetically encoded lipid biosensors [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2025, 122(13):e2426929122] PubMed: 40127277
The mevalonate pathway contributes to breast primary tumorigenesis and lung metastasis [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13716] PubMed: 39119789
PIK Your Poison: The Effects of Combining PI3K and CDK Inhibitors against Metastatic Cutaneous Squamous Cell Carcinoma In Vitro [ Cancers (Basel), 2024, 16(2)370] PubMed: 38254859
Pharmacological Targeting of Androgen Receptor Elicits Context-Specific Effects in Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer [ Cancer Res, 2023, 83(3):456-470] PubMed: 36469363
MDM2 antagonists promote CRISPR/Cas9-mediated precise genome editing in sheep primary cells [ Mol Ther Nucleic Acids, 2023, 31:309-323] PubMed: 36726409
Reciprocal regulation of Daxx and PIK3CA promotes colorectal cancer cell growth [ Cell Mol Life Sci, 2022, 79(7):367] PubMed: 35718818
The Lectin LecB Induces Patches with Basolateral Characteristics at the Apical Membrane to Promote Pseudomonas aeruginosa Host Cell Invasion [ mBio, 2022, 13(3):e0081922] PubMed: 35491830
PIK-75 overcomes venetoclax resistance via blocking PI3K-AKT signaling and MCL-1 expression in mantle cell lymphoma [ Am J Cancer Res, 2022, 12(3):1102-1115] PubMed: 35411248
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Isthmin-1 is an adipokine that promotes glucose uptake and improves glucose tolerance and hepatic steatosis [ Cell Metab, 2021, S1550-4131(21)00326-0] PubMed: 34348115

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.