OSU-03012 (AR-12)

Catalogusnr.S1106 Batch:S110604

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C26H19F3N4O
Molecuulgewicht 460.45 CAS-nr. 742112-33-0
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 92 mg/mL (199.8 mM)
Ethanol 11 mg/mL (23.88 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving OSU-03012 (AR-12) is een krachtige remmer van recombinant PDK-1(fosfoinositide-afhankelijke kinase 1) met een IC50 van 5 μM in een celvrije test, wat een 2-voudige toename in potentie ten opzichte van OSU-02067 laat zien.
Doelen
PDPK1
(Cell-free assay)
5 μM
In vitro

OSU-03012 (AR-12) induceert apoptotische celdood in PC-3 cellen met een IC50 van 5 µM en vermindert de activiteit van geïmmunoprecipiteerd p70S6K. Het onderdrukt de celgroei volledig in een divers bereik van tumorcellijnen bij concentraties van 3–5 μm, vergeleken met een concentratie van minstens 50 μm. Deze verbinding bevordert celdood in grotere mate in glioomcellen dan in niet-getransformeerde astrocyten. Het veroorzaakt een dosisafhankelijke inductie van celdood die niet wordt gewijzigd door p53-mutatie, expressie van ERBB1 VIII, of verlies van fosfatase- en tensinfunctie als gevolg van een homoloog deletie op chromosoom 10. OSU-03012 en ioniserende straling veroorzaken een additieve, caspase-onafhankelijke verhoging van celdood. De dodelijkheid als een enkel middel of in combinatie met signaalmodulatoren wordt niet gewijzigd in cellen die geen expressie van BIM of van BAX/BAK hebben. Het bevordert de afgifte van cathepsine B uit het lysosomale compartiment en die van AIF uit mitochondria. De dodelijkheid van deze verbinding wordt verminderd in proteïne kinase R-achtige endoplasmatisch reticulum kinase-/- cellen, wat correleerde met de verminderde splitsing van BID en onderdrukking van cathepsine B en AIF-afgifte in het cytosol. Het remt de proliferatie en migratie van schildklierkankercellen (NPA, WRO en ARO cellen) en induceert apoptose, wat resulteert in een toename van cellen in de S-fase zonder een toename van cellen in G2. OSU-03012 is een ATP-competitieve remmer van PAK-activiteit en onderdrukt de fosforylering van AKT in schildklierkankercellen. Het remt de celgroei van hepatocellulaire carcinoomcellijnen, inclusief Huh7, Hep3B en HepG2 cellen met IC50-waarden onder 1 μM. Deze verbinding onderdrukt de PDK1- of AKT-activiteit niet of induceert geen cellulaire apoptose, maar induceert autofagie in Huh7 cellen. Bovendien wordt accumulatie van reactieve zuurstofspecies (ROS) gedetecteerd na behandeling. Een recente studie toont aan dat het de gevoeligheid van (Bcr)-Abl mutante cellijnen voor apoptose zou kunnen verhogen.

In Vivo

OSU-03012 (AR-12) onderdrukt tumorgroei met 57,59% en verhoogt gekliefd LC3 in Huh7 tumorxenografts bij 200 mg/kg. Deze verbinding vermindert de expressie van EGFR-eiwit in de tumoren met 48% vergeleken met vehikelcontroles en voorkomt ook dat YB-1 bindt aan de EGFR-promotor in MDA-MB-435/LCC6 xenografts. Het wordt goed verdragen en remt de groei van HMS-97 schwannoma xenografts met 55% na orale toediening.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • PDK-1 Kinase Test

    Deze in vitro test wordt uitgevoerd met behulp van een PDK-1 kinase testkit. Deze celvrije test is gebaseerd op het vermogen van recombinant PDK-1, in aanwezigheid van DMSO-vehikel of OSU-03012 (AR-12), om zijn stroomafwaartse serum- en glucocorticoïd-gereguleerde kinase te activeren, dat op zijn beurt het Akt/serum- en glucocorticoïd-gereguleerde kinase-specifieke peptidesubstraat RPRAATF fosforyleert met [γ-32P]ATP. Het 32P-gefosforyleerde peptidesubstraat wordt vervolgens gescheiden van het resterende [γ-32P]-ATP door gebruik te maken van P81 fosfocellulosepapier en gekwantificeerd in een scintillatieteller na drie wassingen met 0,75% fosforzuur.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    PC-3 cells

  • Concentraties

    0-10 μM

  • Incubatietijd

    ~72 hours

  • Methode

    The effect of OSU-03012 (AR-12) on PC-3 cell viability is assessed by using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay in six replicates. Cells are grown in 10% FBS- supplemented RPMI 1640 in 96-well, flat-bottomed plates for 24 hours. They are exposed to various concentrations of this compound (0-10 μM) dissolved in DMSO (final concentration ≤0.1%) in 1% serum-containing RPMI 1640 for different time intervals (~72 hours). Controls receive DMSO vehicle at a concentration equal to that in OSU-03012-treated cells. The medium is removed and replaced by 200 μL of 0.5 mg/mL 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide in 10% FBS-containing RPMI 1640. The cells are incubated in the CO2 incubator at 37 °C for 2 hours. Supernatants are removed from the wells, and the reduced 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide dye is solubilized in 200 μL DMSO per well. Absorbance at 570 nm is determined by using a plate reader.
Dierstudie:

[4]
  • Dierlijke modellen

    Huh7 tumor xenografts in male BALB/c nude mice

  • Doseringen

    100-200 mg/kg

  • Toediening

    Daily by gavage

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15205346/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16622074/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17673571/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19010909/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15665113/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17595327/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19359162/

Klantproductvalidatie

Serum-deprived HEK293-AT1A cells were pretreated with PD98059 (20 uM; 1 h) or OSU03012 (10 uM; 6 h) prior to 5 min stimulation with AngII (100 nm) or SII (50 uM). A, abundance of phospho-Akt T308 in whole cell detergent lysates. Representative phospho-Akt and total Akt immunoblots are shown above a bar graph depicting the mean ?S.E. of three biological replicates.

Gegevens van [ J Biol Chem , 2014 , 289(38), 26155-66 ]

(C) Orbital fibroblasts, in this case from a patient with TAO, were transfected with PDK1siRNA while fibrocytes were treated with OSU-03012 (5 mM) for 6 h. Cultures were treated as indicated (bTSH, 5 mIU/mL) for 30 min. Cellular protein wassubjected to Western blot analysis of PKCm and pPKCm in fibroblasts (left panel) and PKCbII and pPKCbII in fibrocytes (right panel). (D) Confluentcultures were pre-treated without or with OSU-03012 (5 mM) for 6 h, then treated with nothing (control) or bTSH (5 mIU/ml) for 30 min. Cellular proteins were subjected to Western blot analysis probing with AKT and pAKT antibodies. Inhibition of TSH-dependent pAKT by OSU-03012 in 3 separate experiments was 14.461.2% and 2.560.6% in fibroblasts and fibrocytes, respectively.

Gegevens van [ PLoS One , 2013 , 8, e75100 ]

<p>Apoptosis is detectable in OSU-03012-treated Eca-109 cells. After treatment with or without 2 umol/l OSU-03012 for 24 h, Eca-109 cells were fixed for the TUNEL assay ( x 200).</p>

Gegevens van [ Anticancer Drugs , 2013 , 24(7), 690-8 ]

The effect of specific PI3K (PF-04691502) or PDPK1 (OSU-03012) inhibitor on cell survival in MPM cell lines. (A) Six MPM cell lines and MeT-5A cells were seeded in 96-well plates (2.5 × 10<sup>3</sup> cells per well). On the following day, the cells were treated with the indicated concentrations (50 or 20, 10, 5, 2, 1, 0.5, 0.2, 0.1 and 0.01 μM) of Akt inhibitors (afuresertib, Akti-1/2, AZD5563, GSK690693, ipatasertib, TIC 10, perifosine, PHT427, and MK2206) for 72 h. The percentage of cell survival of 6 MPM cell lines were measured by MTT assay. Data are expressed relative to the mean optic density (550 nm) found in the untreated cells, which was arbitrarily defined as 100%. Data are expressed as the mean ± SE (n=3).

Gegevens van [ , , Cancer Medicine, 2017, 6(11):2646-2659 ]

Sellecks OSU-03012 (AR-12) Is geciteerd door 51 Publicaties

R406 and its structural analogs reduce SNCA/α-synuclein levels via autophagic degradation [ Autophagy, 2025, 1-17.] PubMed: 40143425
NAC1 confines virus-specific memory formation of CD4+ T cells through the ROCK1-mediated pathway [ J Med Virol, 2023, 95(7):e28957] PubMed: 37465969
Salmonella effector SopF regulates PANoptosis of intestinal epithelial cells to aggravate systemic infection [ Gut Microbes, 2023, 15(1):2180315] PubMed: 36803521
AR12 increases BAG3 expression which is essential for Tau and APP degradation via LC3-associated phagocytosis and macroautophagy [ Aging (Albany NY), 2022, 14(20):8221-8242] PubMed: 36227739
Pulmonary fibrosis distal airway epithelia are dynamically and structurally dysfunctional [ Nat Commun, 2021, 12(1):4566] PubMed: 34315881
Development of potent dual PDK1/AurA kinase inhibitors for cancer therapy: Lead-optimization, structural insights, and ADME-Tox profile [ Eur J Med Chem, 2021, 226:113895] PubMed: 34624821
Decanoic Acid Stimulates Autophagy in D. discoideum [ Cells, 2021, 10(11)2946] PubMed: 34831171
Inhibition of heat shock proteins increases autophagosome formation, and reduces the expression of APP, Tau, SOD1 G93A and TDP-43 [ Aging (Albany NY), 2021, 13(13):17097-17117] PubMed: 34252884
OSU-03012 Disrupts Akt Signaling and Prevents Endometrial Carcinoma Progression in vitro and in vivo [ Drug Des Devel Ther, 2021, 15:1797-1810] PubMed: 33958857
Metabolic Modifier Screen Reveals Secondary Targets of Protein Kinase Inhibitors Within Nucleotide Metabolism [ Cell Chem Biol, 2020, 20;27(2):197-205.e6] PubMed: 31734178

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.