Letrozole

Letrozole remt aromatase krachtig af, afkomstig van verschillende bronnen, waaronder menselijke placentamicrosoomen, partikelmatrices van menselijke borstkanker, rattenovariummicrosoomen, MCF-7-cellen getransfecteerd met aromatase (MCF-7Ca), JEG-3 menselijke choriocarcinoomcellen, CHO-cellen, hamsterovariumweefsel en partikelmatrices van menselijke borstkanker met een IC50 van 11, 2, 7, 0,07, 0,07, 1,4, 20 en 0,8 nM. In de niet-cellulaire systemen wordt de IC50 van deze verbinding geschat op 1-13 nM. [1] Het remt de estradiolproductie maximaal in vitro in LH-gestimuleerd hamsterovariumweefsel bij 0,1 µM met een IC50 van 0,02 µM en heeft geen significante invloed op de progesteronproductie tot 350 µM. In ACTH-gestimuleerd rattenbijnierweefsel in vitro wordt de aldosteronproductie geremd met een IC50 van 210 µM. [2] Dit chemische middel remt de groei van de MCF-7 epitheliale borstkankercellen op een dosisafhankelijke manier met een IC50 van 1 nM. Remming kan zelfs bij de zeer lage geteste concentraties (0,1 nM) worden waargenomen. Behandeling van normale MCF-12A epitheliale cellen met deze verbinding beïnvloedde hun groei niet, zelfs niet bij hoge Letrozole-concentraties (100 nM) of langdurige kweekperioden. Gelijktijdige toediening van 17-β-estradiol hiermee (10 nM) verminderde het stimulerende effect van de enzymatische activiteit van MMP-2 en -9, vrijgegeven door estradiol. [3]

Letrozole remt aromatase in vivo met een ED50 van 1-3 µg/kg p.o. [2] Deze verbinding vertoont anti-endocriene effecten. Het remt androsteendion-geïnduceerde uterushypertrofie bij onrijpe ratten met een ED50 van 1-3 µg/kg. Bij de volwassen vrouwelijke rat onderbreekt deze verbinding (0,3-1 mg/kg dagelijks p.o., 14 dagen) de ovariële cycliciteit volledig en vermindert het het uterusgewicht en de serumestradiol (E2)-concentraties in vergelijkbare mate als na ovariectomie. [1] Dit chemische middel induceert dosisafhankelijke regressie van oestrogeenafhankelijke, 9,10-dimethylbenz-a-anthraceen-geïnduceerde mammatumoren bij volwassen vrouwelijke ratten. De ED50 ervoor wordt bepaald op 10 - 30 µg/kg/dag, met volledige remming bij een dagelijkse dosis van 10 µg/dag. [4] Het produceert dosisafhankelijke remming van tumorgroei van MCF-7-cellen getransfecteerd met het menselijke aromatasegen (MCF-7Ca) geïmplanteerd bij athymische naakte muizen, met volledige remming bij 20 mg/kg per dag p.o. [5]

• Menselijke placenta aromatase activiteit

  De test wordt uitgevoerd in een totaal volume van 1 ml bij 37 ℃. Tenzij anders vermeld, bevat het incubatiemengsel 11 nM [4- ¹⁴C] androstene-3, 17-dion ([4- ¹⁴C]A), 24 mM NADPH (tetranatriumzout Type III), de geschikte concentraties van de gewenste remmer en 120 μg microsomaal eiwit. De (4- ¹⁴C)A wordt toegevoegd als een oplossing in 1,7% ethanol in 0,05 M kaliumfosfaatbuffer (pH 7,4), zodat de uiteindelijke concentratie ethanol niet meer dan 0,02% (v/v) bedraagt. De reactie wordt gestart door toevoeging van enzym en gestopt na 20 min door toevoeging van 7 vol ethylacetaat. Het mengsel wordt geagiteerd op een vortexmenger en gecentrifugeerd bij 600 g gedurende 5 min. De waterige fase wordt opnieuw geëxtraheerd met 7 vol ethylacetaat en de gecombineerde extracten worden tot droogte ingedampt met behulp van een Evapo-Mix. Meer dan 99% van de radioactieve [4- ¹⁴C] toegevoegd wordt teruggewonnen met dit extractiesysteem. Het verkregen residu wordt opgelost in 150 μl aceton en 100 μl aliquots worden gedurende 65 min gechromatografeerd op dunne-laagplaten voorbehandeld met silicagel 60 met behulp van ethyl:acetaat:isooctaan (140:60, v/v; systeem A) of tolueen:chloroform:methanol (70:140:20; systeem B). De radioactieve zones van de plaat worden gelokaliseerd met een Berthold LB 2760 dunne-laagscanner. De radioactieve estradiol (E2) en estrone (E1) pieken worden geïdentificeerd door vergelijking met authentieke standaarden. De overeenkomstige bindingsband van silicagel wordt overgebracht naar flacons met 10 ml scintillatievloeistof en geteld met een 6880 Liquid Scintillatiesysteem.

• Cellijnen

  Human breast cancer cells MCF-7

• Concentraties

  ~100 nM

• Incubatietijd

  1 days

• Methode

  Cells are seeded in duplicate at 5,000 to 10,000 cells per well in 24-well plates. The day after plating, different concentrations of Letrozole are added. At the end of incubation, cells are trypsinizated and placed in Isotone solution and counted immediately using a Coulter particle-counter.

• Dierlijke modellen

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7 with human aromatase gene (MCF-7Ca)

• Doseringen

  20 mg/kg/day

• Toediening

  orally administered by gavage once every 2 days