FTY720 (Fingolimod) Hydrochloride

Het remmende effect van S1P wordt tenietgedaan door verschillende concentraties FTY720, met een IC50-effect van 173 nM. Bovendien heeft FTY720 (10 nM) alleen geen effect op de expressie van co-stimulerende moleculen. FTY720 keert de verhoogde expressie van HLA-I om die wordt geïnduceerd door S1P, zowel voor de percentages cellen als voor de MFI, bij het vergelijken van het effect van S1P met het effect van de combinatie van S1P met FTY720. [1] Medium en hoge dosis FTY720-P verhogen ook de niveaus van TGF-β1. TGF-β1 en Foxp3 mRNA-expressie worden opgereguleerd in de hoge dosis FTY720-P-groep. De proliferatie van effector T-cellen wordt significant onderdrukt in de medium en hoge dosis FTY720-P-groep bij een Treg/Teff-celverhouding van 1:1. Bij een verhouding van 1:1 wordt de proliferatie van effector T-cellen ook onderdrukt in de hoge dosis FTY720-groep. [2]

FTY720 is effectief in Ph⁺ maar niet in Ph^- ALL-xenografts met behulp van een vroeg ziektemodel. FTY720 produceert een significante vermindering van de ziektelast in de Ph⁺ ALL-xenografts met behulp van een vroeg ziektemodel. Ph⁺ menselijke ALL-xenografts reageren op FTY720 met een 80% vermindering van de totale ziekte als de behandeling vroegtijdig is gestart. Daarentegen resulteert de behandeling van muizen met FTY720 niet in verminderde leukemie vergeleken met controles met behulp van vier afzonderlijke menselijke Ph^- ALL-xenografts. [3]

• Cellijnen

  Immature DCs

• Concentraties

  10 nM

• Incubatietijd

  4 hours

• Methode

  Immature DCs are left intact or are incubated with 2 μM S1P, 10 nM FTY720, 10 nM SEW2871 or the combinations of S1P with these drugs for 4 hours. As a control 1 μg/mL LPS is used. The cells are washed and incubated in a 96-well plate (v-bottom, 2 × 10⁵ cells per well), washed again and resuspended in PBS buffer containing 0.1% sodium azide. They are labeled with 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD80, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD83, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD86, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-class I, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-DR, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-E, or 1 μg/mL FITC-conjugated mouse IgG as a control. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control FITC-conjugated mouse IgG. To stain NK cells with antibodies for various NK cell activating receptors, they are either left untreated or incubated with 2 μM S1P for 4 hours, washed and stained with 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp30 (CD337), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp44 (CD336), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKG2D (CD314), or as a control 1 μg/mL PE-conjugated mouse IgG1, for 45 min at 4 °C. NK cells are also stained with 1 μg/mL FITC-conjugated anti-killer inhibitory receptor (KIR)/CD158 antibody which recognizes KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DS2 and KIR2DS4, and as a control with FITC-conjugated mouse IgG. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control PE-conjugated or FITC-conjugated mouse IgG.

• Dierlijke modellen

  NOD/SCIDγc^−/− mice bearing ALL cells.

• Doseringen

  5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day

• Toediening

  Administered via i.p.