Camptothecin (CPT)

Catalogusnr.S1288 Batch:S128809

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C20H16N2O4
Molecuulgewicht 348.35 CAS-nr. 7689-03-4
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 4 mg/mL (11.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Camptothecin (CPT) is een specifieke remmer van DNA topoisomerase I (Topo I) met een IC50 van 0,68 μM in een celvrije test. Camptothecin induceert apoptose in kankercellen via microRNA-125b-gemedieerde mitochondriale routes. Fase 2.
Doelen
Topo I
(Cell-free assay)
0.68 μM
In vitro Camptothecin (CPT), een plantalkaloïde die oorspronkelijk in 1966 werd geïsoleerd uit *Camptotheca acuminate*, staat bekend om cellen te stoppen tijdens de S-fase van de mitose. Deze verbinding vertoont nanomolaire potentie in cytotoxiciteit tegen vele menselijke tumorcellijnen, waaronder HT29, LOX, SKOV3 en SKVLB, met IC50-waarden variërend van 37 nM tot 48 nM. In combinatie met TNF induceert het apoptose in primaire muizenhepatocyten, met een IC50-waarde van 13 μM. Het onderdrukte ook de TNF-geïnduceerde NF-κB-activering, evenals de expressie van TNF-receptor geassocieerde factor 2 (TRAF2), X-linked inhibitor of apoptosis protein (X-IAP) en FLICE-inhibitory protein (FLIP). In HCT116-cellen induceert CPT (5 μM) proteasoom-gemedieerde afbraak van gemengde lijn leukemie 5 (MLL5)-eiwit, wat leidt tot fosforylering van p53 op Ser392. Vanwege de lage oplosbaarheid en ongewenste effecten zijn verschillende analogen ontwikkeld, en twee daarvan, topotecan en irinotecan, zijn goedgekeurd door de FDA en worden gebruikt bij chemotherapie tegen kanker.
In Vivo Camptothecin (CPT) (8 mg/kg) vertoont volledige groeiremming en regressie bij muizenxenografts van verschillende tumoren, waaronder colon-, long-, borst-, maag- en eierstoktumoren. Bij muizen veroorzaken combinaties van deze verbinding (50 mg/kg) en TNF (5 en 7 μg/kg), maar niet alleen, leverschade.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[2]
  • Topoisomerase I Cleavable Complex Assay

    Topoisomerase I wordt geïsoleerd uit kalfszwezerik en is vrij van topoisomerase II. Alle reacties worden uitgevoerd in volumes van 10 mL reactiebuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM KCl, 0,5 mM EDTA en 30 pg/mL BSA) in microtiterplaten. Deze verbinding wordt opgelost in DMSO bij 10 mg/mL en serieel verdund in 96-well microtiterplaten waaraan het 32P-eindgelabelde pBR322 DNA en topoisomerase-enzym worden toegevoegd. Het reactiemengsel wordt gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd en vervolgens wordt de reactie gestopt door toevoeging van 2 mL van een mengsel van natriumdodecylsulfaat en proteinase K (respectievelijk 1,6% en 0,14 mg/mL eindconcentraties). De platen worden gedurende 30 minuten op 50 °C verwarmd, 10 mL van een standaard stopmengsel dat 0,45 N NaOH bevat, wordt toegevoegd om enkelstrengs DNA te genereren, en de monsters worden geëlektroforeseerd in 1,5% agarosegels in TBE-buffer. Gels worden geblot op nitrocellulosepapier, gedroogd en blootgesteld aan röntgenfilm. De eenheden van splitsing worden berekend uit de autoradiogrammen en uitgezet tegen de log drugconcentratie. De IC50-waarden worden vervolgens verkregen. Camptothecin (CPT) wordt gebruikt als testverbinding.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    U87MG, A549 and H838 cells

  • Concentraties

    0.17 nM–10 mM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    Tumor cells are plated in 100 μL of medium in 96-well microtiter plates at a density of 1500 to 4000 cells per well and allowed to adhere overnight. Cells are incubated with Camptothecin (CPT) for 48 hours and then with fresh medium for 48 hours. This compound at each concentration is added in quadruplicate. Following a 4-hour incubation of treated cells with MTT, the reduced dye product is extracted from the cells with 0.2 mL of DMSO followed by 50 μL of Sorensen's buffer. The plates are shaken briefly, and the absorbance at 570 nm is read and quantitated. Curves are fitted to the MTT assay data using a four-parameter logistic equation.
Dierstudie:[3]
  • Dierlijke modellen

    Nude mice (NIH-I high fertility strain) bearing xenografts of CASE, SW48, DOY, SPA, and CLO cells

  • Doseringen

    0–8 mg/kg

  • Toediening

    Administered via i.m. or i.v. injection

Referenties

  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ja00968a057
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7853331/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2032244/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15122760/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21423215/

Klantproductvalidatie

Growth suppression by UBE2M silencing is enhanced by DNA damaging agents. Growth sensitivity of HEY cells in the presence of Camptothecin(CPT) was monitored using clonogenic assay.

Gegevens van [ PLoS One , 2014 , 9(7), e101844 ]

<p>U2OS cells transfected with siRNA oligonucleotides were treated with DMSO or camptothecin (1 μM, 1 h) and DNA-PKcs autophosphorylation at S2056 was monitored. Arrow indicates the hyperphosphorylated form of CtIP.</p>

Gegevens van [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

<p>CtIP and exonuclease 1 protect cells from chromosomal damage. (<strong>A</strong>) At 72 h after transfection with the indicated siRNA oligonucleotides, U2OS cells were treated with either DMSO or camptothecin (1 h, 1 μM; acute treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>B</strong>) Cell survival at low doses of camptothecin from the data shown in (<strong>A</strong>). Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>C</strong>) Cells transfected as in (<strong>A</strong>) were treated with either DMSO or camptothecin for 24 h (chronic treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of three independent experiments. (<strong>D</strong>) Metaphase spreads from cells transfected and treated as described in (<strong>A</strong>) were analysed for chromosomal aberrations. A total of 50 metaphase spreads was analysed for each sample. The percentages of metaphase spreads displaying the indicated numbers of radial chromosomes are shown. CNTL, control; DMSO, dimethyl sulphoxide; EXO1, exonuclease 1; siRNA, small interfering RNA.</p>

Gegevens van [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

a. Effects of five concentrations of CXCL12 (0, 10, 50, 100, and 500 ng/ml) on apoptosis of NPC cells caused by 10 μM camptothecin were determined by the amount of cleaved PARP detected by Western blot.

Gegevens van [ , , Tumour Biol, 2016, 37(6):8169-79 ]

Sellecks Camptothecin (CPT) Is geciteerd door 164 Publicaties

Non-canonical functions of DNMT3A in hematopoietic stem cells regulate telomerase activity and genome integrity [ Cell Stem Cell, 2025, S1934-5909(25)00256-5] PubMed: 40680747
Inherited deficiency of DIAPH1 identifies a DNA double strand break repair pathway regulated by γ-actin [ Nat Commun, 2025, 16(1):4491] PubMed: 40368919
A novel biosensor for the spatiotemporal analysis of STING activation during innate immune responses to dsDNA [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00370-y] PubMed: 39984755
DSCC1 restrains 53BP1/RIF1 signaling at DNA double-strand breaks to promote homologous recombination repair [ Cell Rep, 2025, 44(4):115452] PubMed: 40117291
Steroid-Modulated Transcription Synergistically Forms DNA Double-Strand Breaks With Topoisomerase II Inhibitor [ Cancer Sci, 2025, 10.1111/cas.70081] PubMed: 40231641
The novel role of LCK and other PcDEGs in the diagnosis and prognosis of sepsis: Insights from bioinformatic identification and experimental validation [ Int Immunopharmacol, 2025, 149:114194] PubMed: 39904039
The Kinase Inhibitor GNF-7 Is Synthetically Lethal in Topoisomerase 1-Deficient Ewing Sarcoma [ Cancers (Basel), 2025, 17(15)2475] PubMed: 40805174
Peroxiredoxin 1 inhibits tumorigenesis by activating the NLRP3/GSDMD pathway to induce pyroptosis of colorectal cancer cells [ World J Gastroenterol, 2025, 31(36):111557] PubMed: 41025079
Discovery and Characterization of Small Molecule Inhibitors Targeting Exonuclease 1 for Homologous Recombination-Deficient Cancer Therapy [ ACS Chem Biol, 2025, 10.1021/acschembio.5c00117] PubMed: 40378357
DDX18 influences chemotherapy sensitivity in colorectal cancer by regulating genomic stability [ Exp Cell Res, 2025, 444(1):114344] PubMed: 39577603

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.