BIX 02188

Catalogusnr.S1530 Batch:S153001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C25H24N4O2
Molecuulgewicht 412.48 CAS-nr. 1094614-84-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 43 mg/mL (104.24 mM)
Ethanol 3 mg/mL (7.27 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving BIX02188 is een selectieve remmer van MEK5 met IC50 van 4,3 nM, remt ook de katalytische activiteit van ERK5 met IC50 van 810 nM en remt nauw verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK2 en JNK2 niet.
Doelen
MEK5
4.3 nM
In vitro BIX02188 blokkeert significant de katalytische activiteit van MEK5 met een IC50 van 4,3 nM en remt de katalytische activiteit van ERK5 met een IC50 van 0,83 μM. Het vertoont geen activiteit tegen nauw verwante kinasen MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, TGFβR1, EGFR en STK16 met IC50-waarden van 1,8 μM voor TGFβR1, 3,9 μM voor p38α en >6,3 μM voor andere kinasen. Voorbehandeling met BIX02188 remt sorbitol-geïnduceerde fosforylering van ERK5 in HeLa-cellen op een dosisafhankelijke manier en vertoont geen remmende activiteit tegen de fosforylering van ERK1/2, p38 en JNK1/2 MAPKs. Behandeling met BIX02188 alleen gedurende 24 uur in HeLa- of HEK293-cellen vertoont geen cytotoxisch effect. BIX02188 remt transcriptionele activering van MEF2C via de MEK5/ERK5-signaleringscascade in een actief MEK5/ERK5/MEF2C-gestuurd luciferase-expressiesysteem in HeLa- en HEK293-cellen met IC50-waarden van respectievelijk 1,15 μM en 0,82 μM. BIX02188 remt ook de fosforylering van BMK1 in boviene longmicrovasculaire endotheelcellen (BLMECs) die gestimuleerd worden met 300 μM H2O2, op een dosisafhankelijke manier, met een IC50 van 0,8 μM, specifiek door de MEK5-signaalroute te blokkeren. BIX02188 keert het remmende effect op TNF-mediatie volledig om; JNK-activering had een vergelijkbaar effect op BMK1-remming, wat suggereert dat het TNF-signalering remt via activering van de MEK5-BMK1-signaleringsroute.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Katalytische analyse

    MEK5-eiwit geïsoleerd uit een baculovirus-expressiesysteem wordt gebruikt om de kinase-activiteit te meten met behulp van PKLight ATP Detection Reagent. De analyse wordt uitgevoerd met 15 nM GST-MEK5 en 0,75 μM ATP in analysebuffer bestaande uit 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2% BSA, 0,01% CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT en 1% DMSO in aanwezigheid van variërende concentraties BIX02188. Het kinasereactiemengsel wordt gedurende 90 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd, gevolgd door toevoeging van 10 μL van een ATP-detectiereagens gedurende 15 minuten. Het relatieve lichteenheid (RLU) signaal wordt gemeten en de RLU-signalen worden omgezet in percentage van controle (POC) waarden voor de bepaling van de IC50-waarde.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    HeLa cells

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Incubatietijd

    Pretreatment for 1.5 hours

  • Methode

    The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02188 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. A 20 µl sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18358237/

Klantproductvalidatie

<p>Retrograde NGF increased BDNF expression in sensory neurons, which was mediated by the MEK/ERK pathway. In two-compartmented DRG-nerve culture, NGF (50 ng/mL) was added to the chamber containing the sensory axonal terminals. The expression of BDNF was examined in the DRG neuronal soma located in another chamber. After 12 h of NGF treatment, the level of BDNF was increased in the sensory neuronal cell bodies by 3 fold (compare B to A) when compared to control (E). The role of the MEK/ERK pathway in retrograde NGF-triggered BDNF up-regulation was determined by pre-treatment of the ganglia with inhibitors U0126 (C), PD98059 (D) or BIX02188 (E). All inhibitors significantly reduced NGF-evoked BDNF up-regulation in the ganglia when compared to vehicle treatment (F). Results were from 4 independent experiments for each treatment. Bar=80 μm. *, p＜0.05 vs all groups.</p>

Gegevens van [ Exp Neurol , 2012 , 238(2), 209-17 ]

Intracellular location of CD3ζ (left) and CD3ε (right). Activated human T CD4+ cells were treated with DMSO, BIX02188 (10 μM), or XMD8-92 (10 μM) for 1 h at 37°C, permeabilized, and stained with antibodies against CD3ζ (green) or CD3ε (green) and LAMP-1 (red). The samples were visualized by confocal microscopy, and representative images are presented. Original scale bars, 10 mm; n = 2.

Gegevens van [ , , J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52 ]

Sellecks BIX 02188 Is geciteerd door 13 Publicaties

Enhanced Long-Term Antibacterial and Osteogenic Properties of Silver-Loaded Titanium Dioxide Nanotube Arrays for Implant Applications [ Int J Nanomedicine, 2025, 20:3749-3764] PubMed: 40162336
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715] PubMed: 37919293
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6] PubMed: 37919293
Non-canonical Targets of HIF1a Impair Oligodendrocyte Progenitor Cell Function [ Cell Stem Cell, 2021, 28(2):257-272.e11] PubMed: 33091368
ERK5 Inhibition Induces Autophagy-Mediated Cancer Cell Death by Activating ER Stress [ Front Cell Dev Biol, 2021, 9:742049] PubMed: 34805151
Tumor-derived exosomes antagonize innate antiviral immunity. [ Nat Immunol, 2018, 19(3):233-245] PubMed: 29358709
Dual role of ERK5 in the regulation of T cell receptor expression at the T cell surface [Rovira-Clavé X, et al. J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52] PubMed: 26302753
BAFF activation of the ERK5 MAP kinase pathway regulates B cell survival. [ J Exp Med, 2015, 212(6):883-92] PubMed: 25987726
Erk5 inhibits endothelialmigration via KLF2-dependent down regulation of PAK1 [Komaravolu RK, et al. Cardiovasc Res, 2015, 105(1):86-95] PubMed: 25388666
Increased IGF-IEc expression and mechano-growth factor production in intestinal muscle of fibrostenotic Crohn's disease and smooth muscle hypertrophy [ Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2015, 309(11):G888-99] PubMed: 26428636

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.