3-Methyladenine (3-MA)

Catalogusnr.S2767 Batch:S276713

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C6H7N5
Molecuulgewicht 149.15 CAS-nr. 5142-23-4
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO (verwarmd met een waterbad van 50 ºC) 10 mg/mL (67.04 mM)
Ethanol 10 mg/mL (67.04 mM)
Water 4 mg/mL (26.81 mM)
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.750mg/ml (5.03mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 15 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving 3-Methyladenine (3-MA) is een selectieve PI3K-remmer voor Vps34 en PI3Kγ met IC50 van 25 μM en 60 μM in HeLa-cellen. Het blokkeert klasse I PI3K consistent, terwijl de onderdrukking van klasse III PI3K van voorbijgaande aard is, en remt ook autophagosoom-vorming. Oplossingen zijn onstabiel en moeten vers worden bereid.
Doelen
Autophagy Vps34
(HeLa cells)		 PI3Kγ
(HeLa cells)
25 μM 60 μM
In vitro

De lichte voorkeur voor Vps34-preventie door 3-Methyladenine (3-MA) komt waarschijnlijk voort uit een hydrofobe ring die specifiek is voor Vps34, die de 3-methylgroep van deze verbinding omgeeft. Er is gemeld dat het kankerceldood veroorzaakt onder zowel normale als uithongeringsomstandigheden, en het zou ook celmigratie en -invasie kunnen onderdrukken, onafhankelijk van zijn vermogen om Autophagy te remmen, wat impliceert dat het functies bezit die verder gaan dan Autophagy-onderdrukking. Deze verbinding veroorzaakt caspasedependente celdood die onafhankelijk is van Autophagy-inhibitie. Behandeling met 5 mM ervan vermindert het percentage glucose-uitgehongerde HeLa-cellen dat GFP-LC3-puntjes vertoont tot 23%. De niveaus van LC3-I nemen toe en de niveaus van LC3-II nemen af tussen 12 en 48 uur in cellen die met 3-MA worden behandeld. Conversie van LC3-I naar LC3-II wordt onderdrukt door de verbinding. Behandeling van HeLa-cellen ermee bij 2,5 mM of 5 mM gedurende één dag heeft geen invloed op de cellevensvatbaarheid, terwijl behandeling met 10 mM gedurende één dag een afname van 25,0% in cellevensvatbaarheid veroorzaakt. Behandeling van cellen met 2,5, 5 of 10 mM gedurende twee dagen veroorzaakt respectievelijk een afname van 11,5%, 38,0% en 79,4% in levensvatbaarheid. Het vermindert de cellevensvatbaarheid op een tijd- en dosisafhankelijke manier, en verkort de duur van nocodazole-geïnduceerde-prometafase-arrestatie aanzienlijk. Onderdrukking van Autophagy door 3-MA remt SU11274-geïnduceerde celdood. Langdurige behandeling ermee (tot 9 uur) induceert significante LC3 I naar II conversie in wild-type MEF's. Langdurige behandeling met 3-MA, maar niet met wortmannin, verhoogt GFP-LC3-punctering/aggregatie aanzienlijk. De geïnduceerde LC3-conversie en vrije GFP-vrijgave zijn ATG7-afhankelijk. Behandeling ermee leidt tot een duidelijke toename van het p62-proteïneniveau. De verbinding verhoogt het p62-niveau zelfs in Atg5−/− MEF's, evenals in cellen met DOX-gemedieerde deletie van ATG5. Het remt klasse I en klasse III PI3K in verschillende temporele patronen. De geïnduceerde LC3 I naar LC3 II conversie is dramatisch gecompromitteerd in Tsc2−/− cellen in vergelijking met wild-type cellen. Deze verbinding verstoort de anti-autophagische functie van het mTOR complex 1.

In Vivo

3-Methyladenine (3-MA) blokkeert Autophagy door zijn effect op klasse III phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K). Behandeling met deze verbinding verandert de mate van bloeding niet in vergelijking met de subarachnoïdale bloeding (SAH) groep. De voorbehandeling ervan verergert de neurologische symptomen aanzienlijk in vergelijking met de SAH + voertuig groep. Autophagy is verminderd wanneer het wordt toegepast. Omgekeerd is gesplitst caspase-3 sterk opgereguleerd in de SAH + 3-MA groep. In lijn met de opregulatie van gesplitst caspase-3 expressie, is het aantal TUNEL-positieve cellen in de rechter cortex significant verhoogd in de SAH + 3-MA groep in vergelijking met de SAH + voertuig groep.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[4]
  • Eiwitafbraaktest

    HeLa-cellen worden gedurende 24 uur radiogemarkeerd met 0,05 mCi/mL l-[U- 14C]valine. Aan het einde van de markeringsperiode worden de cellen driemaal gespoeld met PBS. Cellen worden gedurende de aangegeven tijden geïncubeerd in ofwel volledig medium of EBSS met of zonder de aanwezigheid van 10 mM 3-Methyladenine (3-MA).
Celassay:

[2]
  • Cellijnen

    HeLa cell line

  • Concentraties

    1-10 mM

  • Incubatietijd

    24, 48 or 72 hours

  • Methode

    After treatment with 3-Methyladenine (3-MA), cell (such as HeLa cell) viability is determined by a trypan blue exclusion assay. Briefly, both adherent and floating cells are collected and suspended in phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4) at a final density of 1-2 × 106/mL. An equal volume of 0.4% trypan blue solution (w/v, in PBS) is added to the cell suspension and mixed thoroughly. After incubation at room temperature for 3 min, cell counting is performed using a hemacytometer.
Dierstudie:

[5]
  • Dierlijke modellen

    Adult male Sprague–Dawley rats weighing 300-350 g

  • Doseringen

    400 nM

  • Toediening

    Intracerebral ventricular

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20574157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22545128/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22466960/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20123989/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22521819/

Klantproductvalidatie

granulosa cells (GCs) with 24 h of melatonin (10 μM) treatment were rinsed in PBS, and then exposed to H2O2 (200 μM) for 2 h. The autophagy inhibitor 3-MA (10 mM), or the apoptosis inhibitor Z-VAD-FMK (50 μM) were added 1 h prior to H2O2 incubation. Cell viability was determined using the CCK-8 assay. Data represent mean ± S.E; n = 3 in each group. *P < 0.05 (**P < 0.01) vs. vehicle group at 0 h. # Represents P < 0.05 (## Represents P < 0.01) vs. H2O2-only-treated cells. & Represents P > 0.05 vs. H2O2-only-treated cells. N, not significant, P > 0.05. δ Represents P < 0.05 (δδ Represents P < 0.01) vs. Z-VAD-FMK-treated cells.

Gegevens van [ , , Redox Biol, 2018, 18:138-157 ]

MDC-labeled vacuoles were induced by AZD2014 and inhibited by autophagy inhibitor (3-MA). SMMC-7721 cells were treated with AZD2014 or rapamycin at concentrations of 100 and 600 nM, respectively, for 48 hours in the presence or absence of 3-MA, and then stained with MDC. Cells were immediately observed under a confocal microscope. Cells in the control group were treated with DMSO. bars, 20 μm.

Gegevens van [ , , Am J Cancer Res, 2015, 5(1): 125-139 ]

Cells were treated with DMSO, TDCIPP (100 μM) only, or pretreated with 3-MA before treatment with TDCIPP (100 μM). LC3 conversion and beclin-1 and p62 expression were assessed by western blotting at 24 h

Gegevens van [ , , Food Chem Toxicol, 2017, 100:183-196 ]

PC-9/ER cells were treated with CX-4945 (5 mM) for 48 h in the presence or absence of 3-MA (2 mM) and Atg7 siRNA (100 nM). Cleavage of PARP-1 and caspase-3 was shown by Western blot analysis. CT: without CX-4945; CX: CX-4945; CX+G: CX-4945 + gefitinib; CX+E: CX-4945 + erlotinib.

Gegevens van [ , , PLoS One, 2014, 9(12): e114000 ]

Sellecks 3-Methyladenine (3-MA) Is geciteerd door 978 Publicaties

Cooperative nutrient scavenging is an evolutionary advantage in cancer [ Nature, 2025, 10.1038/s41586-025-08588-w] PubMed: 39972131
Host glutathione is required for Rickettsia parkeri cell division and intracellular survival [ Nat Commun, 2025, 16(1):5547] PubMed: 40593553
Viruses hijack FPN1 to disrupt iron withholding and suppress host defense [ Nat Commun, 2025, 16(1):5912] PubMed: 40595467
RNF167 mediates atypical ubiquitylation and degradation of RLRs via two distinct proteolytic pathways [ Nat Commun, 2025, 16(1):1920] PubMed: 39994288
Unfolded protein response kinase PERK supports survival and metastasis of circulating tumor cell clusters via SAM synthesis and H3K4me3-dependent PDGFB signaling [ Cancer Commun (Lond), 2025, 45(12):1706-1733.] PubMed: 41212905
Extracellular LCN2 Binding to 24p3R in Astrocytes Impedes α-Synuclein Endocytosis in Parkinson's Disease [ Adv Sci (Weinh), 2025, 12(39):e01694] PubMed: 40686313
USP10 Inhibits Ferroptosis via Deubiquinating POLR2A in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma [ Adv Sci (Weinh), 2025, 12(36):e12271] PubMed: 40605431
Disrupting AGR2/IGF1 paracrine and reciprocal signaling for pancreatic cancer therapy [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101927] PubMed: 39914384
TBK1 is a signaling hub in coordinating stress-adaptive mechanisms in head and neck cancer progression [ Autophagy, 2025, 1-23.] PubMed: 40114316
H3K36me2 methyltransferase NSD2/WHSC1 promotes triple-negative breast cancer metastasis via activation of ULK1-dependent autophagy [ Autophagy, 2025, 21(8):1824-1842] PubMed: 40097917

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.