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Bafilomycin A1 (Baf-A1) inhibiteur de la V-ATPase

N° Cat.S1413

La Bafilomycin A1 (Baf-A1) est un inhibiteur de la H+-ATPase vacuolaire avec une IC50 de 0,44 nM, et il est constaté qu'elle inhibe l'autophagy tout en induisant l'apoptosis.
Bafilomycin A1 (Baf-A1) Proton Pump Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 622.83

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Contrôle qualité (Quality Control)

Lot : Pureté: >97%
97

Produits Souvent Utilisés Avec Bafilomycin A1 (Baf-A1)

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Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
human H4 cells Function assay 0.4 μM 24 h Induction of light chain 3-GFP level in human H4 cells at 0.4 uM after 24 hrs by high throughput fluorescence microscopy relative to control 18024584
RAW 264.7 cells Function assay 100 nM Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM 19307359
mouse RAW264.7 cells Apoptosis assay 100 nM 16 h Induction of apoptosis in mouse RAW264.7 cells assessed as late apoptotic cells at 100 nM after 16 hrs using annexin V-propidium iodide staining by flow cytometry 19307359
human HeLa cells Function assay 400 nM Induction of autophagy in human HeLa cells expressing EGFP-LC3 assessed as increase in LC3-2 level at 400 nM 18391949
human MCF7 cells Function assay 4 h Inhibition of rapamycin-induced autophagy in human MCF7 cells expressing EGFP-LC3 assessed as decrease in EGFP levels at 100 nM after 4 hrs by Western blotting relative to control 20028134
RAW 264.7 cells Bactericidal activity assay 100 nM 16 h Bactericidal activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as decrease in bacterial growth yield at 100 nM after 16 hrs postinfection by flow cytometry in presence of 10 ug/ml of intracellular replication inhi 19307359
RAW 264.7 cells Antimicrobial activity assay 100 nM Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as increased nitric oxide production in infected cells at 100 nM 19307359
RAW 264.7 cells Antimicrobial activity assay 100 nM 30 mins Antimicrobial activity against Salmonella enterica Typhimurium 14028 infected in RAW 264.7 cells assessed as inhibition of bacterial replication at 100 nM treated 30 mins before infection measured after 2 to 16 hrs postinfection by flow cytometry 19307359
rat 3Y1 cells Function assay Induction of morphological changes in rat 3Y1 cells assessed as elongation of cells 29701963
human Huh7.5.1 cells Antiviral activity 3 h Antiviral activity against HCV genotype 2a JFH-1 in human Huh7.5.1 cells assessed as reduction of viral entry up to 3 hrs by luciferase assay 26396683
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 622.83 Formule

C35H58O9

 Stockage (À partir de la date de réception)
N° CAS 88899-55-2 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles CC1CC(=CC=CC(C(OC(=O)C(=CC(=CC(C1O)C)C)OC)C(C)C(C(C)C2(CC(C(C(O2)C(C)C)C)O)O)O)OC)C

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci n'est que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de l'ajout précédent est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
H+-ATPase
(Cell-free assay)
0.44 nM
In vitro
La Bafilomycin A1 (Baf-A1) est un antibiotique macrolide toxique dérivé de Streptomyces griseus, qui inhibe le courant de court-circuit induit par l'épithélium du manteau externe (OME). L'IC50 et la dose d'inhibition maximale de ce composé sont respectivement de 0,17 μM et 0,5 μM. De plus, il inhibe l'afflux d'acide avec une valeur d'IC50 de 0,4 nM. Il inhibe également l'acidification de manière dose-dépendante, ce qui entraîne une moindre extinction et donc une fluorescence plus élevée. Ce composé prévient la vacuolisation des cellules Hela induite par H. pylori, avec une concentration inhibitrice donnant 50% du maximum (ID50) de 4 nM, et est très efficace pour restaurer les cellules vacuolisées à une apparence normale. Il affecte également le transport du matériel endocytosé des compartiments endocytiques précoces aux compartiments tardifs, non seulement en dissipant le faible pH endosomal mais aussi en bloquant le transport des endosomes précoces aux endosomes tardifs dans les cellules HeLa. À des doses de 0,1-1 μM, il inhibe complètement l'acidification des lysosomes révélée par l'incubation avec l'orange d'acridine dans les cellules BNL CL.2 et A431. Lorsqu'il est ajouté à la solution saline équilibrée de Hanks, la dégradation des protéines endogènes est fortement inhibée et de nombreux autophagosomes s'accumulent dans les cellules H-4-II-E. Il empêche également l'apparition d'HRP endocytosée dans les vacuoles autophagiques.
Kinase Assay
Dosages d'activité enzymatique ATPase
Le milieu de dosage enzymatique de l'ATPase contient 6 mM de MgSO4, 50 mM de HEPES (pH 7,4), 200 mM de Na2SO3 (activateur de la V-ATPase), 0,5 mM d'ortho-vanadate de sodium (inhibiteur de la P-ATPase), 0,5 mM d'azide de sodium (inhibiteur de la F-ATPase) et 3 mM de Na2ATP. Ce milieu (1,0 mL), avec ou sans l'ajout de l'inhibiteur de la V-type ATPase Bafilomycin A1 (Baf-A1), est incubé avec l'homogénat filtré (0,1 mL) pendant 60 minutes à 23–25 °C. La réaction est arrêtée par l'ajout de 1 mL de TCA 3%. Des blancs spectrométriques sont préparés comme pour le dosage enzymatique, à l'exception que l'échantillon tissulaire est ajouté après l'acide. L'analyse des phosphates est réalisée en ajoutant 2 mL de 1-butanol et 0,2 mL de solution de molybdate (5 g de molybdate d'ammonium, 22 mL de H2SO4 à 100 mL). Après agitation au vortex pendant 15 secondes, la solution est neutralisée avec 0,5 mL de solution de citrate (100 g/500 mL, pH 7,0) et à nouveau agitée au vortex pendant 15 secondes. La solution est ensuite centrifugée (2000 × g; 3 minutes) pour séparer la phase butanolique et l'absorbance de cette phase est lue à 400 nm. Des étalons d'orthophosphate sont préparés (0,1 μM–2,0 μM) et traités de la même manière que les dosages d'activité enzymatique. L'activité enzymatique est exprimée en μmol d'orthophosphate libéré par heure et par milligramme de protéine. L'activité V-ATPase est considérée comme la différence entre l'activité ATPase totale mesurée en présence de Na2SO3, d'orthovanadate de sodium et d'azide de sodium et l'activité ATPase mesurée en présence de ces réactifs et de ce composé.
In vivo
La Bafilomycin A1 (Baf-A1) (1 μM et 0,1 μM) inhibe complètement l'activité résorptive des ostéoclastes en culture. Ce composé inhibe de manière dose-dépendante le taux d'absorption de Na+ chez le jeune tilapia avec un Ki de 0,16 μM.
Références
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8446034/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9811698/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1832676/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9639028/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7817803/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10574743/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713959/

Applications (Applications)

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot Ret / EGFR / p75 NGFR
S1413-WB1
21559479
Growth inhibition assay Cell viability
S1413-viability1
20534000
Immunofluorescence AIF LC3
S1413-IF1
25512644
ELISA TNF-alpha
S1413-ELISA1
26240140

Questions fréquemment posées (Frequently Asked Questions)

Question 1:
How to dissolve it？

Réponse :
S1413 is soluble in DMSO at 6 mg/ml. Please do not use alcohols as solvent, because this compound will degrade in alcohols.